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RENJIBIO:教您血清、血浆如何分离

血清制备方法：

使用无热原无内毒素的试管或离心管采集血液样本，将试管或离心管在室内温度下放置自然凝固（视室温环境10分钟到2小时不等）或4℃过夜，分离出血清，（建议倾斜试管或离心管以扩大液面的横截面，使血清能更大程度的分离出来，），2-6℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，立即进行测定，建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存，避免反复冻融，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

血浆制备方法:

应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠、枸橼酸纳或柠檬酸钠作为抗凝剂，使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本，采集后30分钟内，混合10-20分钟后，2-6℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清液（血浆），建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存，避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

血清、血浆分离的注意事项:

血清、血浆分离过程中特别需要注意两点：防止溶血和细胞混入。

1.快：血液环境的稳定性与保存时间的长短呈反比，细胞膜的稳定性也在下降，在这种情况下，应尽快开展血清、血浆的分离，并严格按照操作说明进行，避免出现溶血现象，血清、血浆分离后务必避免反复冻融。

2.慢：离心速度不能过快，过快的离心速度会造成红细胞压积，容易产生溶血。

3.冷：血液样品如不能马上进行血清或血浆的分离，则尽量冷藏保存和运输，但是，不能冷冻，否则血细胞会形成冰晶造成细胞破裂而溶血。

RENJIEBIO小知识：
1.抗凝剂选择：不同的抗凝剂有其不同的分子构型，会对血液中各细胞的细胞膜产生不同的作用，有的会增加细胞膜的稳定性，有的会降低细胞膜的稳定性，所以选择一款合适的抗凝剂至关重要（检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书，查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求）。

2.样品处理不当的危害：血液存放过程中温度过高或反复冻融对细胞膜有很大的损害。温度过高及反复冻融会使细胞膜上的结构蛋白构象发生改变，进而造成细胞膜的弹性降低以致破解产生溶血现象，所以用于分离血清、血浆的血液应避免反复冻融。

血清质量是怎样影响检测的？

1. 溶血：红细胞的破裂会引起血浆成分的改变，对一些生化项目如谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、钾的测定结果造成较大的影响。若进行抗体类检测本身血清的颜色会干扰到终的酶标仪读数。

2. 脂血：在运用比色法和比浊法检测的项目中，脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通过双波长进行消除从而影响检测结果。

3. 黄疸：黄疸的血清中含有胆红素，若样本放置时间过长或通过氧化剂后胆红素还可被氧化为胆绿素、胆褐素，这些色素在不同波长范围具有一定的光吸收，从而影响检验结果。

常见的血液生化指标与激素

常见的血液生化指标：血糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、镁、钙等。

常见的激素：睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)等。