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2020/7/22 16:58:29生化实验中缓冲液是*的，以MOPS缓冲液为主。MOPS，适用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究；可以配制成多种琼脂培养基，在极限培养基中作为无毒缓冲液应用于棒状链霉菌的培养和头孢菌素的生产；可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳（IEF）的电解质系统成分；还可应用于Northern杂交，作为RNA的分离和转膜时的缓冲液。如此重要的缓冲液，配方是什么？本文总结了几乎所有MOPS缓冲液的配方供您参考。
（1）MOPS Buffer (10×)
试剂 | 质量(1 L) | 终浓度 |
|---|---|---|
超纯MOPS | 41.86 g (or 46.26 g钠盐) | 0.2 M |
无水醋酸钠 | 4.1g(或6.8g 三水合醋酸钠) | 0.05 M |
Na2EDTA (0.5M, pH 7.5) | 20 mL | 0.01 M |
注意事项：
用NaOH将pH调至7.0（如果使用MOPS钠盐，则使用冰醋酸调节pH）；
不需要高压灭菌；
在室温下避光储存，用铝箔覆盖。
（2）MOPS buffer (5X)
试剂 | 质量 (100 mL) | 终浓度 (5X) |
|---|---|---|
MgSO4 | 0.1204 g | 10 mM |
MOPS | 10.463 g | 0.5 M |
NaCl | 14.61 g | 2.5 M |
将上述试剂溶解在50mL H2O中，用NaOH调节pH至7.5，定容至100mL。过滤消毒，避光储存。
（3）MOPS salts
试剂 | MOPS | Tricine | FeSO4•7H2O | NH4Cl | K2SO4 | CaCl2•2H2O | MgCl2 | NaCl |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
含量 | 400mM | 40mM | 0.1mM | 95mM | 2.8mM | 5μM | 5.3mM | 0.5M |
上述试剂配制的溶液终体积为1L，过滤灭菌。
（4）MOPS-EGTA buffer
试剂 | 质量(for 1 L) | 终浓度 |
|---|---|---|
MOPS | 20.9 g | 0.1 M |
MgSO4 | 0.24 g | 2 mM |
EGTA | 0.38 g | 1 mM |
NaCl | 29.2 g | 0.5 M |
将上述试剂溶解在800mL DEPC处理的水中，用NaOH调节pH至7.5，然后加入定容至为1L。使用0.22μm过滤器对缓冲液进行过滤灭菌。
（5）MOPS 电泳缓冲液
0.2M MOPS（pH 7.0），20mM乙酸钠，10mM EDTA（pH 8.0）。
10x溶液：将41.8g MOPS溶解在700mL DEPC处理过的水中，用2N NaOH调节pH至7.0。加入20mL DEPC处理的1M乙酸钠和20Ml DEPC处理的0.5M EDTA（pH8.0），定容至1升。过滤灭菌，室温避光保存。
（6）PFA-MOPS-EGTA fixation buffer
试剂 | 质量(50 mL) | 终浓度 |
|---|---|---|
多聚甲醛 | 2 g | 4% (w/v) |
NaOH (1 N) | 5 mL | / |
HCl (1 N) | 5 mL | / |
MOPS-EGTA | 50 mL | / |
将2g多聚甲醛加入5mL的1N NaOH中，加热至60°C溶解。加入5mL 1N HCl和35mL MOPS-EGTA缓冲液。4°C下保存。
希望这些配方可以帮助您在实验中取得成功。
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