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2020/8/7 16:04:17 造模机制
人的脑血管阻塞以大脑中动脉比较常见,在阻断大鼠大脑中动脉后,可引起大脑半球皮层和基底核缺血性损伤,以海马CA1研究。和人的病理改变相似。
实验方法
1.大鼠大脑中动脉栓塞
不同品种大鼠在阻断大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后脑梗死面积(体积的大小和恒定性不同,
Sprague-Dawley大鼠比较常见。MCAO引起的脑梗死范围与年龄无关,-般用250~ 350g体重的大鼠,雌雄均可,但以雄性为宜。目前比较标准方法是:以12%水合三氯氣vy醛麻醉(350mg/kg, ip大鼠,侧卧位固定于手术台上,头皮切口,分离颞肌,取外眦和外耳i j连线的中点,用牙科钻或环形颅钻钻开颅骨、暴露MCA,在手术显微镜下辨认大脑中动脉及其分支,在分支的下方即MCA的近段,分离结扎或烧灼MCA,注意保护脑组织免受损害,取颈部切口分离结扎同侧的颈总动脉
(common carotid artery,CCA)。电凝时为避免电凝不*所致的出血,尽里将MCA挑起,使血管内血里减少。另外,为保护周围组织免受灼伤,可用湿棉球保护。阻断大脑中动脉后用小块肌肉组织轻敷于颅窗上,然后逐层缝合伤口,术后回笼词养。以上过程均在室温恒定(24~ 25C )情况下进行,以利于评价脑缺血的程度。然后用- -小块肌肉轻敷颅骨窗口,逐层缝合后,将动物放回笼中。
模型特点
本法手术成功率高,缺点为操作较为复杂。根据每批动物MCA的侧支丰富程度不同,产生梗死面积约在15%~ 24%。阻断MCA的部位与梗死面积有很大关系,将豆状纹状体动脉和皮层分支与MCA远端的侧支循环分开,在MCA开口处与大脑下静脉之间,或嗅束外端2mm接近MCA部位烧灼MCA较长-段,则可引|起较恒定的大脑皮层和基底神经核团的梗死。若烧灼靠近嗅束很短- -段MCA,则只有2/3动物出现脑梗死。
2.大鼠短暂性MCAO(缺血-再灌)模型
体重350~ 450g大鼠,麻醉后大鼠仰卧固定,颈部正中切口约2cm,在肩胛舌骨和胸锁乳突肌形成的三角处暴露右(或左)侧CCA及其分支颈外动脉(external carotid artery, ECA)和颈内动脉<(intemal carotid artery,ICA)。结扎ECA的分支枕动脉、甲状腺_上动脉及ECA终末支,分离ICA的颅外分支翼突腭动脉。夹闭CCA、ICA,自ECA插入- -端加热成圆珠状(直径<0.3mm)的尼龙线并将其导入ICA,松开ICA夹,继续将尼龙线插入颅内至大脑中动脉的起始部位,感到阻力明显时,即可阻断
MCA,此时插入的尼龙线长约20mm(自颈内外动脉分叉处算起)。若要研究缺血再灌注,由颈外动脉进入大脑中动脉,然后再将尼龙线往回抽到颈外动脉处,就可进行再灌注。
模型特点
本方法在不开颅的情况下,造成MCA供血区缺血。因其简单易操作,重现性好,易掌握,并可进行再灌注,近年应用较普遍,并被推广应用到SHR大鼠、小鼠和沙鼠上。