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2020/9/9 9:40:44注意事项:
1.一般供给的小鼠ELISA试剂盒为无菌,无需再过滤除菌。如发现小鼠ELISA试剂盒有悬浮物,则可将小鼠ELISA试剂盒加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
2.需要长期保存的小鼠ELISA试剂盒有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时刻切勿超过1个月。由于小鼠ELISA试剂盒结冰时体积会增加约10%,因而,小鼠ELISA试剂盒在冻入低温冰箱前,有必要预留一定体积空间,不然易发作污染或玻璃瓶冻裂。
3.瓶装小鼠ELISA试剂盒冻结需采用逐渐冻结法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的小鼠ELISA试剂盒放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(小心勿形成气泡),使温度与成分均一,削减沉积的发作。切勿直接将小鼠ELISA试剂盒从-20℃进入37℃冻结,这样因温度改变太大,容易形成蛋白质凝聚而出现沉积。
4.热灭活是指56℃, 30分钟加热已*冻结的小鼠ELISA试剂盒。加热过程中须规矩摇晃均匀。此热处理的意图是使小鼠ELISA试剂盒中的补体成分(complement)灭活。除非有必要,一般不建议作此热处理,因为热处理会形成血清沉积物显著增多,而且还会影响小鼠ELISA试剂盒的质量。补体参与反响有: 滑润肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发作化学趋化和活化。
5.切勿将小鼠ELISA试剂盒在37℃放置太久,不然血清会变得污浊,同时小鼠ELISA试剂盒中的有效成分会破会而影响小鼠ELISA试剂盒质量。
6.血清中的沉积物
处理与保存方法:
1. 细胞培养上清:适用于小鼠ELISA试剂盒检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2. 细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3. 血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5. 体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6. 组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
7. 样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果样品小鼠ELISA试剂盒不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。