（一）分光光度计的检验
为保证测试结果的准确可靠，新制造、使用中和修理后的分光光度计都应该定期进行检定。国家技术监督局批准颁布了各类紫外、可见及近红外分光光度计的坚定规程。我们在验收仪器时应按照仪器说明书及检验合同进行验收。检定规程规定，检定周期为半年，两次检定合格的仪器检定周期可延长至一年。下面简单介绍分光光度计的检验方法。
1．波长的准确度
波长准确度是指单色光大强度的波长值与波长指示值之差。可以用氧化钬溶液（上海析谱仪器网有卖）241.1 361.2 416.7 536.8 640.8 (需标定）、氘灯486.00nm的谱线来检验。
镨钕玻璃、钬玻璃在相当宽的波长范围内有特征吸收峰。由仪器生产厂作为附件提供。镨钕滤光片的吸收峰为528.7nm和807.7 nm。
如果经检验仪器的波长准确度不合格，应按照仪器说明书进行调整。
2．稳定度
在光电管不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3min，读取透射比（透过率）的变化，即为零点稳定度。
在光谱范围两端向中间靠10nm处，例如TU1901型仪器的200nm和1000nm处，按zero（动力学测试）（数显仪器调至100％）处，观察3min读取透过率的变化，即为光电流稳定度。
3.透射比正确度
透射比的校正的方法中有中性玻璃滤光片法（可见光区）（上海析谱仪器网有售）和标准溶液法。
经常使用的使标准溶液法，具体操作为：配置质量分数0.06000/1000（即1000g溶液中含K2Cr2O70.06000g）的K2Cr2O7的0.001mol/LHClO4的标准溶液。以0.001mol/LHClO4为参比，以1cm的石英吸收池分别在235、257、313、350nm波长处测定透射比，与表13－4所列标准溶液的标准值比较，根据仪器级别其差值应在0.3％－2.5％之内。
表13－4质量分数0.06000/1000 K2Cr2O7溶液的透射比
4.杂散光
不属于单色器给定波长，由于反射或散射等射到检测器的光称为杂散光。杂散光的检验是在较短波长下，测定某透过溶液的投射比。根据仪器的级别不同，有的T>0.001%，有的到T<0.6%。
光栅式仪器用1cm配套合格的吸收池，在380nm处，以蒸馏水为参比，测定50.0g/L的亚硝酸钠标准溶液的透射比（透射信号和入射信号之比），即为仪器在相应波长处的杂散光。
5.吸收池的配套性
在定量工作中，尤其是在紫外光波长测定时，需要对吸收池作校准及配对工作，以消除吸收池的误差。
配套性检验方法是：石英吸收池在220nm处，装蒸馏水；在350nm处，装K2Cr2O7的0.001mol/L HClO4溶液。玻璃吸收池在600nm处，装蒸馏水；在400nm处，装K2Cr2O7溶液（配法同上）；以一个吸收池为参比，调节T为100.0％测定其它各池的透射比。透射比之差小于0.5％的池可配对成一套。
在实际工作中，可采用如下校准方法：在测定波长下，将吸收池磨砂面用铅笔编号，于干净的吸收池中装入测定用溶剂，以其中一个为参比，测定其它吸收池的吸光度，若测定的吸光度为零或两个吸收池的吸光度相等，即为配对吸光池。若不能配对，可选出吸光度小的吸收池为参比，测定其它吸收池的吸光度，求出修正值。测定样品时，将待测溶液装入标准过的吸收池中，将测得的吸光度值减去该吸收池的修正值即为测定的真实值。
（二）分光光度计的保养和维护
分光光度计是光学、精密机械和电子技术三者紧密结合而成的光谱仪器。正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要的作用。
1.分光光度计实验室
①室温一保持在15－28℃
②相对湿度宜控制在45％－65％，不要超过70％
③防尘、防震和防电磁波干扰。仪器周围不宜有强磁场。
④防腐蚀。应防止腐蚀性气体，如SO2、NO2及酸雾等侵蚀仪器部件。应与化学操作室隔开。当测量具有挥发性或腐蚀性样品溶液时，吸收池应加盖。
2.仪器保养和维护方法
①在不使用时不要开光源灯。如灯泡发黑（钨灯）、亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置。不要用手直接接触窗口或灯泡，避免油污粘附，若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。
②单色器是仪器的核心部分，装在密封的盒内，一般不宜拆开。要经常更换单色器盒的干燥剂，防止色散元件受潮生霉。
③吸收池在使用后应立即洗净，为防止其光学窗面被擦伤，必须用擦镜纸或柔软的棉织物擦去水分。生物用品、胶体或其它在池窗上形成薄膜的物质要用适当的溶剂洗涤。有色物质污染，可用3mol/LHCl和等体积乙醇的混合液洗涤。
④光电器件应避免强光照射或受潮积尘。
⑤仪器的工作光源一般允许220V+-10%的电压波动。为保持光源灯和检测系统的稳定性。在电源电压波动较大的实验室配备稳压器（有过电压保护）。
定量分析紫外分光光度定量分析和可见分光光度定量分析的定量依据和定量方法都是相同的，这里不再重复。
