分光光度计的参数调校

1. 波长准确度的验证
波长准确度是分光光度计的一项重要技术指标，它对定性、定量及结构分析结果影响极大。检查波长准确度的方法很多，如用标准镨钕滤光片、氧化钬滤光片、氧化钬波长标准溶液、氘灯或低压汞灯发射的光谱线及干涉滤光片等。但zui常用的办法还是用氧化钬波长标准溶液。

注意：不管是滤光片还是标准溶液，随着时间的推移，吸收峰的位置均有变化，验证之前强烈建议先到有关部门标定标准溶液或滤光片。
     
2. 光度准确度的验证
 光度准确度是分光光度计的另一项重要技术性能指标，它对定性、定量及结构分析结果影响很大。
检查光度准确度，通常是利用经过仔细反复测量的中性滤光片作为标准光度片来检测的。
中性滤光片是一种对一定波长范围内的光具有几乎相同的透射比（或吸光度）的滤光片，利用它对波长变化及带宽变化不敏感的特性，来检查仪器的光度准确度和重复性。

 按国家有关分光光度计检定规程规定，在可见光区域内用中性滤光片作光度检测标准，在紫外光区域内用紫外中性滤光片或重铬酸钾标准溶液作为光度检测标准。而且，中性滤光片的光度值都在10%T（1.000A）,20%T（0.699A）,30%T（0.523A）左右。检测波长为：可见分光光度计440nm,546nm,635nm,紫外可见分光光度计235nm,257nm,313nm,350nm.
光度准确度的验证，均采用单点模式测试，以下是546nm处光度准确度的验证步骤：
（1） 将波长设置在546 .0nm处；
（2） 将测试方式置于透过率（%T）模式；
（3） 打开样品室盖，将20%T左右的中性滤光片插入样品槽中；
（4） 将参比物（以空气作为参比）拉（推）入光路中；（在一般的测试情况下，*个样品槽作为参比，第二个样品槽放置标准物质）
（5） 盖好样品室盖，.按<0ABS/100%T>键调整“100%T”；
（6） 将测试方式置于吸光度（ABS）模式；
（7） 将20%T的中性滤光片拉（推）光路中，观察并记录其透射比的值，如果实测值误差超出仪器技术指标允许的范围时，仪器便需要重新调试或维修了。
3．其他验证
 除上述两项zui基本，也是zui重要的验证之外，分光光度计还需要做一些其他的验证，比如：杂散光，光谱带宽，噪声水平，漂移等多项指标的验证，限于篇幅，这里不一一介绍，有兴趣者，可查阅《中华人民共和国国家计量检定规程JJG 178-96》,以下仅对杂散光的验证作一简单介绍。
杂散光使测试结果偏离吸收定律—朗伯比耳定律。当杂散光被样品吸收时，偏离是正的（即测定值大于真实值）。当杂散光不被样品吸收时，偏离是负的（即测定值小于真实值）。
检查杂散光，一般用特定的溶液或截止滤光片在特定的参数下测试。
 
通常可用碘化钠标准溶液测定220nm处的杂散光，用亚硝酸纳标准溶液测定360nm处的杂散光。或用半高波长220nm、340nm、和400nm的截止滤光片测定220nm、340nm、和400nm处的杂散光。测量步骤与光度准确度一样，仍用单点模式测试，只是这时不用中性滤光片，而是用截止滤光片罢了。