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2020/10/27 10:41:53
蛋白银染试剂盒说明书
Protein Silver Stain Kit
蛋白银染试剂盒
目录号:K2012
保存条件:室温保存。
组分说明
Cat. No. K2012
Kit Size 20次
Silver Stain Sensitizer(500×) 2×1 ml
Silver Stain Enhancer 3ml
Silver Stain 2×250 ml
Silver Stain Developer 4×125 ml
产品简介
本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具
有目的条带清晰、背景低,操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步
短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。
注意事项
1.操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。
2.整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约60 rpm左右。
3.需自备乙醇,冰醋酸。
本产品仅供科研使用,请勿用于临床诊断及其他用途
使用说明
以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,一般用量25 ml。对于大型凝胶,各溶液的使用量需按凝胶体
积的比列放大。请提前准备好50 ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50 ml洗脱液(10%乙醇)和50 ml终止液(5%的冰醋酸)。
1.水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
2.固定:用25 ml固定液固定凝胶2次,每次固定15分钟。
3.洗脱:固定完成后用洗脱液洗胶2次,每次洗涤5分钟。
4.水洗:用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
5.增敏:将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中,室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次,每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制:取50 µl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25 ml超纯水中,混匀。
6.银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50 µl Silver Stain Enhancer混匀。
7.水洗:用超纯水快速洗胶2次,每次洗涤准确控制为20秒。
8.显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育2-3分钟,直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30µl Silver Stain Enhancer混匀。
注意:显影30秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9.终止:用终止液洗去凝胶上的显影液后,将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。
实验代做服务:
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