微量BCA蛋白定量试剂盒说明书
MicroBCAProteinAssayKit
微量BCA蛋白定量试剂盒
Cat.No. K2011
保存：BSA 标准品：2-8℃
其 它 组
分：室温
组分说明
Catalogno. K2011
Volume 120ml
MicroBCAReagentA （MA） 120ml
MicroBCAReagentB （MB） 120ml
MicroBCAReagentC （MC） 6ml
BSA （2mg/ml） 2ml
产品简介
BCA 蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于 BCA（BicinchoninicAcid）法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与 Cu2+络合生成络合物，同时将 Cu 2+ 还原成 Cu +BCA 试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物。在562nm 处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒专为低蛋白浓度样品的蛋白定量而设计，可精*&确测定浓度为 2.5-200 μg/ml 的蛋白溶液，试剂盒的灵敏性高，平行性好，不同种蛋白之间的测量差异极低。本试剂同多种非离子型去污剂有较好的相容性。
注意事项
1. BSA 标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致（可用 1×PBS 或 0.9%生理盐水进行稀释）。
2. 操作中请佩戴手套。
3. 本产品仅限科研使用。
操作步骤
1. 稀释 BSA 标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释 BSA 标准品。
管号 稀释液用量（μl） 标准品用量（μl） 终浓度（μg/ml）
A 360 40 200
B 400 100（从A管中取） 40
C 250 250（从B管中取） 20
（从 管中取）
D 250 250 C 10
E 250 250（从D管中取） 5
F 250 250（从E管中取） 2.5
G 250 0 0(空白)
2. 配制 MicroBCA 测试工作液：根据标准品和样品的数量配制测试液。
试剂 MD 配制：4volumeMC+100volumeMB
测试工作液 WR 配制： 1volumeMA+1volumeMD
充分混匀后待用
3. 试管及微板检测（蛋白浓度检测范围：2.5-200 μg/ml）
1）按上表准备好标准品及待测样品。
2）将蛋白样品和测试工作液 WR 按照 1:1（体积比）比例加入，充分混匀。在 60 度孵育 60 分钟。
3）孵育完成后冷却到室温，在 562nm 处读取吸光度值。
4）标准品与待测样品的吸光度值要扣除空白对照的吸光度值，然后进行浓度的计算。
5）如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内，请重新稀释样品后再次测定。
附表
附表 1. 干扰物质表
化合物 耐受浓度 化合物 耐受浓度
缓冲液 去垢剂和变性剂
乙酸盐 0.2M Brij35 1%
甘氨酸 1M CHAPS 1%
HEPES 0.1M 盐酸胍 4M
MES 50mM NP-40 1%
MOPS 50mM 辛葡糖 1%
Na+-柠檬酸 ＜1mM SDS 1%
PIPES 50mM Triton X-100 1%
磷酸钠 0.1M 糖类
乙酸钠 0.2M pH 5.5 葡萄糖 10mM
TES 50mM 蔗糖 1M
Tris 0.1M 螯合剂
盐类 EDTA 10mM
还原剂
硫酸铵 干扰
NaCl 1M β-巯基乙醇 50μM
尿素 3M DTT 1mM
极性化合物 其他
DMSO 5% 脂类 干扰
甘油 10% HCl/NaOH 0.1M
实验代做服务：
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