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【应用手册合集】探索细胞内部的秘密

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2020/10/28 10:12:02
 
 

【应用手册合集】探索细胞内部的秘密

 
 

 

 
 

现代细胞生物学需要借助于全面的、多种的检测手段来满足全新研究方向的需求,每次获得的成就都会令人无比兴奋。细胞荧光成像检测技术时至今日已在各个实验室中得到广泛的应用。

 
 

 

 

 
 

我们的 SpectraMax i3x  iD3&iD5 型多功能微孔板检测系统多种检测功能实现不同检测目的,荧光法下不仅仅可以用于细胞活力分析、检测细胞的G蛋白偶联受体激活过程、ROS ( 活性氧 ) 和分析各种细胞因子含量,甚至能够用于检测和分析纳米颗粒探针的光谱学特征和利用其*的蛋白印迹检测功能分析鉴定 CRISPR/Cas9 基因编辑功能。也可借助内置注射器模块,Westernblot 检测和成像分析功能和预置于 SoftMax Pro软件内的检测模板,方便为我们轻松打开了一扇用于研究蛋白相互作用及细胞周期分析的大门。

 
 

 

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 12篇细胞检测应用手册单册

 
 

 

 

 

 
 

1篇:在微孔板读板机上使用成像和免疫印迹检测法验证 CRISPER 编辑的细胞

基因组编辑已被广泛应用于基因表达和蛋白质功能的研究,但这些方法中有许多是复杂的和不准确的。CRISPR / Cas9 系统由于其较高的准确性和易操作性,已经成为一种非常流行的基因编辑工具。已知的外源 DNA短序列被表达为 CRISPR 靶向 RNA(crRNA),引导 Cas9 酶切割任何含有类似序列的外源 DNA。通过利用这一系统,研究人员可以研究基因沉默和转录调控的效果,并有可能减轻患病细胞的遗传疾病。

 
 

 

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CRISPER/Cas9 机制,Cas9 酶被首先结合的向导 RNA 激活,然后结合到包含 3-核苷酸 PAM 序列的匹配的基因上。

 
 

 

 

 

 

 
 

2篇:如何利用远红外荧光对细胞内活性氧进行检测

活性氧 (Reactive oxygen speciesROS) 是一类由细胞有氧代谢产生的具有化学反应活性的一类含氧分子,参与细胞信号转导、免疫防御以及维持体内动态平衡等各项生理活动。然而当细胞处于环境压力时,胞内的 ROS 含量水平就会急剧上升造成核酸、蛋白和脂类物质的氧化损伤,从而引起许多生理、病理变化,诸如男性不育、癌症的发生等等。

 
 

 

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远红外荧光光谱扫描:Cell Meter 深红色荧光 ROS 检测试剂的激发/发射图谱如上所示。

 
 

 

 

 

 

 
 

3篇:表面功能化纳米颗粒的特征光谱分析

鉴于其在生物医学研究的应用潜力,纳米技术是一个快速发展的领域并受到科学界的持续关注。纳米材料通常直径小于100 nm,足够能穿透哺乳动物细胞。纳米材料具有较大的表面积体积比,因此适于通过表面功能化偶联靶向或治疗性分子。在全身给药的情况下,偶联的靶向分子可完成对特定细胞群体如肿瘤细胞的标记,而偶联的治疗性化合物则可以针对标记的细胞群体发挥作用。

 
 

 

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纳米颗粒表面功能化图解。

 
 

 

 

 

 

 
 

4篇:如何准确评价 HTRF 细胞因子检测与其细胞活性变化的关系

本应用介绍了如何使用 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机和 SpectraMax Minimax300 细胞成像仪如何对细胞因子分泌和细胞活性进行分析。本文将介绍 (i) 如何经过处理的 PBMC 中诱导细胞因子分泌,(ii) 如何通过HTRF方法检测细胞因子,(iii)如何用 Molecular Devices 公司的 EarlyTox细胞完整性检测试剂盒评估 PBMC 活性,(iv) 何将细胞因子浓度转化成 PBMC 活性。

 
 

 

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LPS + 地塞米松处理 PBMC。利用 SoftMax Pro 软件中的分类特性,识别活细胞 ( 红色 ),但没有识别的死细胞 ( 蓝色 )

 
 

 

 

 

 

 
 

5篇:细胞系开发过程中 IgG 检测流程的简化

在不同的研究人员中,以抗体为基础的治疗药物的细胞系开发过程可能有很大不同。终目标是找到可以稳定产生大量单克隆抗体的细胞克隆。IgG 产物检测在开发和生产单克隆抗体的多个阶段都是非常重要的一步。通常 IgG 定量的方法都需要专门的仪器和技术人员,这里,我们向大家介绍使用 Valitacell 公司的 Valita®TITER实验来检测抗体开发和生产过程中 IgG 的方法。

 
 

 

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从细胞转染到扩大生产的细胞系开发过程。

 
 

 

 

 

 

 
 

6篇:应用微孔板读板机和双报告系统检测 NF-κB 活性

在这里我们将展示如何在哺乳动物细胞模型中,通过双荧光报告检测系统和SpectraMax iD5 微孔板读板机来检测核转录因子κB (NF-κB)的活性。NF-κB是参与细胞进程中许多基因表达的主要调节者。肿瘤坏死因子α (TNF-α)可以激活细胞信号通路来降解NF-κB的抑制剂,从而促使其释放并进入核内,调节数百目的基因的表达。

 
 

 

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NF-κB 信号通路。TNF-α 激活信号层级反应使 NF-κB 抑制剂 IKB 降解,并释放 NF-κB 转录因子。

 
 

 

 

 

 

 
 

7篇:葡萄酒中残糖含量的测定利用 SpectraMax MiniMax 细胞成像系统检测细胞周期

球体是小型的 3D 细胞培养微环境,可以用于诸如低吸附微孔板等特殊的方法进行细胞培养。这种体外 3D 细胞培养模型具有高度的临床及生物可靠性,并且已经被广泛应用于高通量筛选 (HTS) 和高级细胞培养,从而方便对诸如化合物毒性和癌症等重大疾病进行研究。

 
 

 

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FUCCI 细胞球图像。

 
 

 

 

 

 

 
 

8篇: SpectraMax 微孔读板机上利用KASP 基因分型技术检测 SNPs

在本篇应用文献中,我们展示了使用来自LGC 基因组学的 KASP 检测验证试剂如何在SpectraMax 微孔读板机上读取终的 KASP产物。di一个实验是为了验证每种荧光染料都可在读板机中得到特定的信号,染料包括FAMHEX  FAM/HEX。第二个实验中,使用由供应商提供的已知 DNA 样品进行KASP 实验,PCR 产物在读板机中检测以验证样品的正确基因型。

 
 

 

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KASP 基因分型结果。

 
 

 

 

 

 

 
 

9篇:SpectraMax iD3微孔板读板机上进行细胞活性实验来评估细胞健康状态

从活性和凋亡等多个表征评估细胞健康状态能协助我们深入了解多种情况下,包括候选药物,特定通路的激活、抑制剂处理以及报告基因的表达所带来的影响。目前有多种方法可用于测定细胞健康状态,其中比较常见的是通过微孔板读板机结合荧光检测法。该应用指南展现了在SpectraMax® iD3多功能微孔板读板机上应用EarlyToxTM系列细胞活性检测试剂盒进行细胞健康评估。

 
 

 

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细胞活性检测实验流程图

 
 

 

 

 

 

 
 

10篇:借助于具有注射器模块的 SpectraMax i3x 实时监测 G 蛋白偶联受体激活过程

在本篇应用文献中,我们介绍了如何利用配有注射器模块的 SpectraMax®i3x 多功能微孔板读板机来对两种不同的细胞系进行钙离子浓度测定。CHO M1WT3 是采用中国仓鼠卵巢细胞稳定转染 M1 毒蕈碱的 Gq 受体细胞,1321N1是人星形细胞瘤细胞系具有内源性毒蕈碱胆碱能受体,借助于 SoftMax®Pro 软件的数据分析功能jingque获得两个细胞系的 EC50 IC50 值,我们与以前使用高通量筛选系统获得的结果进行比较。

 
 

 

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SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机进行钙流检测。

 
 

 

 

 

 

 
 

11篇:NanoBRET 技术及如何利用 SpectraMax i3x 多功能微孔板读板机进行相应检测实验

本篇技术性短文介绍了如何利用 SpectraMaxi3x 多功能微孔板读板机进行 NanoBR ET 检测,分别介绍了如何利用仪器内置的检测模式进行 NanoBRET 检测以及如何利用具有更高灵敏度的 NanoBRET 卡盒进行相应检测,如果利用更灵敏的检测卡盒可将定量检测下限提高四倍以上。

 
 

 

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NanoBRET检测模块 ( 蓝色 ) 下和化学发光模块 ( 橙色 ),曲线标配检测模块后低检测下限大约0.58%,光栅模式下检测下限大约 2.6%

 
 

 

 

 

 

 
 

12篇:利用 SpectraMax iD3 微孔板读板机检测内源色氨酸荧光

我们将展示如何运用SpectraMax®iD3多功能微孔板读板机检测内源色氨酸荧光。色氨酸标准曲线用来显示检测方法的高灵敏性,而色氨酸发射峰值的偏移则用溶菌酶变性实验来检测。溶菌酶包含有两个色氨酸残基,因此受到紫外光照射时会发射荧光。当溶菌酶降解时,色氨酸的发射光峰值会偏移6-10nm。我们可以对降解前后的溶菌酶进行荧光光谱扫描来捕获和检测发生的峰值偏移。

 
 

 

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