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谈谈LB培养基常用的灭菌方法

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2020/11/20 9:16:58
  今天我给大家讲讲微生物检查LB培养基常用的灭菌方法:
 
  1、湿热灭菌:蒸汽在冷凝时释放出大量潜能,并且蒸汽具有强大穿透力,蒸汽的湿热破坏菌体蛋白质和核酸的化学键,使酶失活,微生物因代谢障碍而死亡。湿热灭菌的效果,取决于致死温度和致死时间。致死温度是杀灭微生物的极限温度。致死时间是在致死温度下杀灭全部微生物所需时间。
 
  高压蒸汽灭菌适合于耐高温LB培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基分装后应立即灭菌,应在当天内完成灭菌工作,不可过夜。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。
 
  2、过滤除菌:一些抗生素及有机物等,遇热容易分解,不能与LB培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌,例如含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基。过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(50-60℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。
 
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