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2021/1/5 15:56:26从新药研发角度来说,因口服给药是经济的方式,在研究中。动物实验中,灌胃是口服给药的方法,然而,看似简单的几步,可对于初学者因为手法不当而伤到气道或食道,进而引起小鼠死或者逐渐消瘦至死亡。那么在灌胃的实验中,我们究竟该掌握哪些注射手法和技巧呢?下面1起来看看!
灌胃: 借助器械(灌胃针)将药物直接灌入动物胃内;
药物循环途径:食管→胃→小肠→小肠毛细血管(吸收入血)→空回肠静脉→肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→右心房→右心室的吸收进入血液循环。
灌胃给药模式图
特点:
安q性高:各种给药方式中,口服给药是稳的;
可选的剂型比较多:只要保证药物是均匀且稳定即可;
给药体积大:小鼠:0.1-0.8ml(0.2 ml /10g);大鼠:1-3ml。
生物利用度低:药物经胃肠道吸收,并存在胃肠道首过代谢和肝脏首过代谢,生物利用率相对较低,仅为静脉的25-30%;对于部分化合物吸收不恒定,误差较大。
灌胃的实验步骤
准备工具
8/9/12号灌胃针头配套1.0 ml注射器;如下图为9号灌胃针头/1.0 ml注射器,为了防止插入时造成损伤,针头呈倒水滴型。
注射器
注:
灌胃针的分类:如下图为小鼠灌胃常见灌胃针类别,根据尺寸不同有8/9/12号;另外还有直头和弯头区别;
灌胃针的选择:尺寸大小的选择1般可根据小鼠的年幼决定,如<30g,建议用8、9号;30g以上可选择12号;其中9号针头直径小于常规的大头,特别适用幼鼠;直头弯头可根据个人习惯选择,初学者建议先适用弯头练习;
灌胃针的获取:可直接购买,不建议手动处理的注射器针头,易刺伤小鼠食道;
灌胃针的深度:因为动物有个体差异,实验前可先测量小鼠口腔至胃的距离,进而选择合适长度的灌胃针,避免插入过深或过浅。小鼠入针1般3-4cm,大鼠一般4-6cm。
操作步骤
固定小鼠:用左手拇指和食指抓住鼠耳和颈部皮肤,用左手的无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,使其头、颈和身体在1条直线;若第1次抓取时不得当,1定要放开重抓,以免影响后续操作;
进针:右手持注射器(1ml的注射器配灌胃针头),从1侧嘴角进针,轻压舌根,轻轻向前推,进入食管后会感觉有个刺空感,缓慢推进,1般当针插入小鼠3~4cm,即灌胃针的3/4时即可注射;
注意: 若感到阻力或动物挣扎比较厉害时,说明插错位置,应马上停止进针或将针拔出;待动物恢复平静后,再次尝试。
常见问题解答
灌胃后,为何小鼠死亡?
主要考虑2种原因,① 因为小鼠的气管靠近食管,若灌胃针误入气管,药物会进入气管导致小鼠当场窒息死亡;②刺伤食道:若入针不当,损伤或穿破食管,会导致小鼠逐渐消瘦并死亡。
灌胃时为了避免小鼠死亡,应该注意?
要主要正确抓取和插入。抓取时:小鼠体位一定要保持,头、颈部及身体1条线,尽量保证插入的是食管而不是气管。插入时:嘴角进针,然后竖直向下,先试探性的稍微用力,慢慢向下,1旦感觉有阻碍就得停止,针无阻力才可注射。
大鼠灌胃和小鼠区别主要在于哪里?
大鼠操作步骤与小鼠基本一样,但因大鼠个体很大,易挣扎,所以难度更大,所以1定要准确抓取;另外灌胃针型号不样,多用16号,20号适合更大型大鼠,并根据注射药物的量配套2或5ml的注射器