生化需氧量检测是指在好氧条件下，微生物分解水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程所消耗的溶解氧量，这个生化过程时间很长，在20℃下培养，完成此过程需要100天。目前国内外采用的都是20±1℃培养5d作为检验指标，分别测定水质样品培养前后的溶解氧之差。
今天我们的主要目的就是让大家能够了解生化需氧量（BOD）的检测方法及意义，掌握此类方法的操作技能。
生化需氧量检测所需仪器
1. 恒温培养箱
2. 5-20l细口玻璃瓶
3.1000-2000ml量筒
2. 玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm，在棒的底端固定一个直径比量筒底小，并带有几个小孔的硬橡胶板。
5.溶解氧瓶：250-300ml之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。
6.虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。
检测生化需氧量时所用试剂
1.将8.5g磷酸二氢钾(KH2PO3),21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4),33.4g七水合磷酸氢二钠(N2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NHC)溶于水中,稀释至1000ml此溶液的pH应为7
2.硫酸镁溶液
将225g七水合硫酸镁(MgSO·7H2O)溶于水中,稀释至1000ml。
3.氯化钙溶液
将27.5g无水氯化钙溶于水中,稀释至1000ml。
4.氯化铁溶液
将0.25g六水合氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水中,稀释至1000ml。
5.盐酸溶液(0.5mol/L)
将40ml盐酸(=1.18g/m)溶于水中,稀释至1000ml。
6.>氢氧化钠溶液(0.5mol/L)
将20g氢氧化钠溶于水中,稀释至1000ml。
7.亚硫酸钠溶液(1/2Na2SO2=0.025mol/L)
将1.575g亚硫酸钠溶于水中,稀释至1000ml。此溶液不稳定,需每天配制。
8.葡萄糖一谷氨酸标准溶液
将葡萄糖(CH2O)和谷氨酸( HOOC--CH2CH2CHNH2-OOH)在103℃干燥1h后,各称取150mg溶于水中,移入1000ml容量瓶内并稀释至标线,混合均匀,此标准溶液临用前配制。
9.稀释水
在5~20L玻璃瓶内装入一定量的水,控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机或薄膜泵,将吸入的空气先后经活性炭吸附管及水洗涤管后,导入稀释水内曝气2~8h,使稀释水中的溶解氧接近于饱和。停止曝气亦可导入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布,置于20℃培养箱中放置数小时,使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸缓冲溶液各1ml,并混合均匀。
稀释水的pH应为7.2,其BOD应小于0.2mng/L
10.接种液
可选择以下任一方法,以获得适用的接种液。
①城市污水,一般采用生活污水,在室温下放置一昼夜,取上层清液供用。
②表层土壤浸出液,取100g花园或植物生长土壤,加入1L水,混合并静止10min,取上清液供用
③用含城市污水的河水或湖水
④污水处理厂的出水
⑤当分析含有难于降解物质的废水时,在其排污口下游3~8km处取水样作为废水的驯化接种液。如无此种水源,可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气,每天加入少量该种废水,同时加入适量表层土壤或生活污水,使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物,或检查 其化学需氧量的降低值出现突变时,表明适用的微生物已进行繁殖,可用作接种液。一般驯化过程需要3~8d。
11.接种稀释水
分取适量接种液,加于稀释水中,混匀。每升稀释水中接种液加入量为:生活污水1~10ml;或表层土壤浸出液20~30ml;或河水、湖水10~100ml。
接种稀释水的pH值应为7.2,BOD值以在0.3~1.Omg/L之间为宜。接种稀释水配制后应立即使用。
检测水中生化需氧量
1.不经稀释水样的测定
(1)溶解氧含量较高、有机物含量较少的地面水,可不经稀释,而直接以虹吸法,将约20℃的混匀水样转移入两个溶解氧瓶内,转移过程中应注意不使产生气泡。以同样的操作使两个溶解氧瓶充满水样后溢出少许,加塞。瓶内不应有气泡。
(2)其中一瓶随即测定溶解氧,另一瓶的瓶口进行水封后,放入培养箱中，在20+1℃培养5d。在培养过程中注意添加封口水。从开始放入培养箱算起,经过五昼夜后,弃去封口水,测定剩余的溶解氧。
2.需经稀释水样的测定
(1)稀释倍数的确定:根据实践经验,提出下述计算方法,供稀释时参考。
①地表水:由测得的高锰酸盐指数与定的系数的乘积,求得稀释倍数。
②工业废水:由重铬酸钾法测得的COD值来确定。通常需做三个稀释比。使用稀释水时,由COD值分别乘以系数0.075、0.15、0.225,即获得三个稀释倍数。使用接种稀释水时,则分别乘以0.075、0.15和0.25三个系数。
注意: CODer值可在测定COD过程中,加热回流至60min时,用由校核试验的邻苯二甲酸氢钾溶液按COD测定相同操作步骤制备的标准色列进行估测。
后通过计算得出不经稀释直接培养水质样品的生化需氧量，已经稀释后培养水样的生化需氧量。
