现在,越来越多的人开始使用组织培养苗技术,该技术现已得到广泛应用。组织培养和育苗技术种类繁多,高质量培养基是决定植物组织培养成败的关键因素之一。普通介质主要有两种,固体介质和液体介质。两者之间的区别在于是否添加了凝结剂。那么培养基的组成成分都有哪些呢?
(1)水
生命活动的物质基础绝大多数的介质是水,实验研究中常用的水是蒸馏水,理想的水应该是纯净水,即双重蒸馏水。在生产中,为了降低成本,我们可以使用优质的自来水或软水来代替。
(2)无机盐
植物可在高质量培养基中吸收的宏观元素和微量元素都是培养基中的无机盐。培养基中提供的无机盐主要包括硝酸铵,硝酸钾,硫酸铵,氯化钙,硫酸镁,磷酸二氢钾,磷酸二氢钠等。不同培养基配方的含量不同。
(3)有机营养素
包括碳水化合物,主要用于提供碳源和能源。常见的有蔗糖,葡萄糖,麦芽糖和果糖。维生素主要用于植物组织的生长和分化,常用的维生素有盐酸硫胺素,烟酸,生物素等。氨基酸物质,常见的甘氨酸,丝氨酸,谷氨酰胺,天冬酰胺等,有助于外植体的生长并促进不定芽和胚的分化。
(4)植物生长调节剂
培养基中植物生长调节剂的量很小,但效果很好。它不仅可以促进植物组织的去分化和愈伤组织的形成,而且可以诱导不定芽和胚的形成。常用的是植物生长素和细胞分裂素,有时也使用赤霉素和脱落酸。
(5)天然有机添加剂
香蕉汁,椰子汁,土豆泥和其他天然有机添加剂有时会产生良好的效果。但是,这些物质的重现性差,并且会因高压灭菌而变性并失去其作用。
(6)凝结剂
对于固体培养,应在培养基中添加凝结剂。常用的是琼脂和角叉菜胶,用量一般为7-10克/L之间。前者通常用于生产中,而后者是高度透明的,但价格昂贵。
(7)其他添加剂
有时为了减少外植体的褐变,有必要在培养基中添加一些抗褐变物质,例如活性炭,维生素C等,也可以添加一些抗生素物质可抑制杂菌的生长。
(8)pH
高质量培养基的pH也是影响植物组织培养成功与否的因素之一。pH值水平应根据所种植植物的类型来确定。如果pH值太高或太低,则介质将变硬或变软。在生产或实验中,经常使用氢氧化钠或盐酸进行调节。