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鲎试剂分类及选购--细菌内毒素检测试验新手必看

厦门市鲎试剂实验厂有限公司

2009/1/5 11:01:50

鲎试剂分类及选购--细菌内毒素检测试验新手必看
  

显色基质鲎试剂、凝胶法鲎试剂、特异性鲎试剂、动态浊度法鲎试剂、比色法鲎试剂、显色法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、浊度法鲎试剂 、动态比浊法鲎试剂、弃G因子鲎试剂、终点显色法鲎试剂...。

如果你是一位刚准备做细菌内毒素检测的实验人员,看到有这么多种鲎试剂,是不是有个疑问:“这么多种鲎试剂,我该怎么选择呢?”
别急,不要被这么多名字吓到了,以下为您详细分类介绍;
首先,知道什么是鲎试剂。鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物,经低温冷冻干燥而成的生物试剂,于细菌内毒素检测。

按原料来源分:
*有5个种属的鲎,其中仅有中国鲎(又名三刺鲎)Tachypleus tridentatus Leach
和美洲鲎 Limulus polyphemus Linnaeus可制造鲎试剂,对应生产出来的鲎试剂分别为
中国鲎鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate),缩写为TAL;美洲鲎鲎试剂
(Limulus Amebocyte Lysate),缩写为LAL。TAL与LAL有相同的功效。

按方法分:
中国药典2005年版中收录了2种细菌内毒素检查法,即凝胶法和光度测定法,后者包括
浊度法和显色基质法。供试品检测时,可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果
有争议时,除另有规定外,以凝胶法结果为准。
05年中国药典附录细菌内毒素检查法
详见http://www.houshiji.com/newslist.asp?newsid=135&sort=2

凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。
凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.5ml/支或者更大装量,使用时应加无热原水
(细菌内毒素检查用水)复溶后使用。2005年版药典中凝胶法鲎试剂结果的判断:保温
60分钟±2分钟后观察结果。部分商家所说的半小时出结果的快速凝胶法鲎试剂是没有
依据的,没到时间就观察结果可能导致假阴性。特异性鲎试剂(又叫弃G因子鲎试剂)是
凝胶法鲎试剂的一种,细菌内毒素及β-葡聚糖均能与鲎试剂发生凝聚反应。特异性鲎试
剂就是屏蔽β-葡聚糖引起的鲎试剂凝聚反应,使鲎试剂仅与内毒素起反应。一般中草药
注射液成份复杂,干扰因素较多,常含有β-葡聚糖或内毒素类似物。用特异性鲎试剂能
减少或消除假阳性反应。(应做对比及干扰试验)。

光度测定法分为浊度法和显色基质法,这2种方法都是定量检测内毒素的。
浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方
法。根据检测原理,可分为终点浊度法和动态浊度法。终点浊度法未见与商品化产品,
不再赘述。动态浊度(比浊)法是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度
所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度的方法。

显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈
色团的多少而测定内毒素含量的方法,因使用分光光度计或酶标仪器,又称为比色法。
根据检测原理,分为终点显色法和动态显色法。厦门鲎试剂厂于2005年即推出以鲎四肽
为原料的鲎试剂盒。国内有少量国外产品,但价格远高于国产试剂,到货周期长。动态
比色法与终点比色基本原理差不多。目前暂无动态比色法,我公司正在试验中,相信很
快就会面市。

如果您是药厂、医院、医疗器械厂商等单位的实验人员,仅需要检测样品的内毒素限
量,则应选择凝胶法鲎试剂,通过确定内毒素限值及zui大有效稀释倍数,做样品的干扰
试验从而确定使用的鲎试剂的灵敏度。
如果您需要定量测定样品中内毒素含量则应选择显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂。
动态浊度法鲎试剂一般需要配备的动态浊度仪或带有特定软件的酶标仪,比较适合
样品量较多的用户(如每天都要检测,而且样品数多)。如已有天大BET系列仪器用户
可选择我公司动态浊度法鲎试剂。尚未购买的用户可选择我公司即将上市的新款内毒素
测定酶标仪。

显色基质鲎试剂用酶标仪或分光光度计检测。是样品数较少(少于200-300个),设备
比较简陋的用户,是科研院校等单位试剂。如果已有内毒素检测酶标仪,则
可选择显色基质鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂,我公司即将推出,敬请关注。
简单的说,鲎试剂就2种:定性和定量,定性就选凝胶法(特殊产品用特异性鲎试
剂)。定量就是显色法鲎试剂盒或动态浊度法鲎试剂(根据已有仪器定)。如果有
动态比色法鲎试剂那就多一种选择(当然要看成本)。
相信通过以上介绍您对鲎试剂已经有一定了解,聪明的你一定知道如何去选择鲎试剂了
吧!


特别说明:由于环境污染等原因,鲎的数量在不断减少。中国台湾澎湖海洋生物研究中心黄
丁士副研究员正在做养殖鲎的研究,他培育出12000尾刚孵化的“一龄鲎”, 60天后有
250尾脱壳成“二龄鲎”,仅有少部分“二龄鲎”再经历2周成为“三龄鲎”。“二龄鲎”
到“三龄鲎”的阶段存活率只有5%,人工繁殖技术上一直未能突破“三龄鲎”的瓶颈而
停滞。日本也曾经划出鲎保护区,专门用来进行人工养殖鲎,但经过多年实验以失败告
终。鲎的产卵量很大,但是能活到成年的比例很小。一只鲎必需脱壳15到16次,需要15
年达到成年,只有成年鲎才可以采血,因此人工养殖鲎基本上不太可能。部分酒家所谓
的人工养殖大多是将成年鲎圈养起来。部分保护动物是可以经营利用的,前提是,被经
营利用的必须是这些野生动物经人工养殖繁殖的后代。 因此所有酒家经营的鲎都是非
法的。目前日本等国由于鲎的数量减少不得不进口美洲鲎及中国鲎原料来生产鲎试剂。
因此,请看到此文的朋友不要吃鲎,也请转告您身边的亲朋好友保护它。


厦门鲎试剂厂专业生产各种鲎试剂及细菌内毒素检测系列产品,如还不了解可查询我公司查看更多资料    厦门鲎试剂厂 www.houshiji.com

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