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如何用 Origin 计算 ELISA 实验结果?

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2021/5/18 11:17:07

  ELISA实验终于做完了,结果被计算难倒了,作为科研人绝不认输,那恒远小编就给大家分享下,如何用 Origin 计算 ELISA 实验结果。作为 ELISA 实验的后步,检测结果的计算对整个实验十分重要,不小心就半途而废了......

 

以夹心法为例:

1.ELISA 的样本通常要设置 1~2 个复孔进行检测,分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的 20%;

2. 样本的 OD(吸光度)平均值要减去标准品浓度为 0 时的 OD 平均值;

3. 建立标准曲线。

在对数坐标图上拟合四参数的逻辑函数曲线(X 轴上为标准品浓度,Y 轴为对应的OD值)。推荐使用 origin 软件。详细步骤如下:

 

第Ⅰ步:输入 OD 值和标准品浓度

 

第Ⅱ步:选择拟合曲线类型

选中输入的数值框,按如下操作依次点击选项。


 

第Ⅲ步:勾选「find specific X/Y」

完成上述操作后,点击 Fit 按键,拟合曲线和相关信息将自动(如第四步所示)

 

第Ⅳ步:查看标准曲线信息(如参数值,R-Square 等)

 

第Ⅴ步:设置坐标轴类型为对数

双击第四步中的拟合曲线图,对其进行编辑。双击 X 轴、Y 轴设置坐标类型为「Log10」。

 

 

第Ⅵ步:根据标准曲线计算样本浓度

选择第四个工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列输入样本的 OD 值,对应的浓度将在右列自动。

 
如果样本的 OD 值超出标准曲线的上限,请在实验适当稀释样本以获得精确结果。在分析数据时,样本实际浓度应为标准曲线上获得的浓度乘以稀释倍数。
 

 

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