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甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒产品说明书

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2021/5/19 17:36:50

甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒产品说明书(中文版)

 

主要用途甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒产品说明书

 

甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂是一种旨在使用烷化剂甲磺酸乙酯诱导细胞发生变异而产生HPRTTK基因功能缺失的突变株,成为筛选应用标记细胞的而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于动物细胞和人体细胞。产品严格无菌,即到即用,性能稳定,突变频率高。

 

技术背景

 

甲磺酸乙酯(ethyl methanesulfonateEMS)是一种化学诱变致畸的烷化剂(alkylating agent)。它将导致细胞-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferaseHPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶(thymidine kinaseTK)基因座发生位点突变,而引起基因功能缺失。由此采用6-硫氢基鸟粪嘌呤(6-thioguanine6-TG)和5-溴脱氧尿嘧啶(5-BromodeoxyuridineBudR)分别筛选TKHPRT缺失型细胞,因为6-TGPURINES的结构替代物,而BUdRTHYMIDINE的结构类似物,当TKHPRT正常的情况下,它们将利用6-TGBUdR进行DNA复制而使细胞死亡,反之,它们无法利用,细胞则继续生存。这是负向选择。但是HPRT正常的细胞(例如正常人体细胞,其X染色体的长臂上带有此基因)能在氨基嘌呤胸苷hypoxanthine/aminopterin/thymidineHAT培养基中生长,这是正向选择。

 

产品内容

 甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒产品说明书

 EMS 溶液AReagent A         5毫升

 EMS 溶液BReagent B     5毫升

 EMS 溶液CReagent C     5毫升

 EMS 溶液DReagent D     5毫升

 EMS 溶液EReagent E     5毫升

清理液(Reagent F)      2 X 500毫升

染色液(Reagent G        200毫升

 TK筛选液Reagent H    12毫升

产品说明书              1

 

保存方式

 甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒产品说明书

 TK筛选液Reagent H保存在-20℃冰箱里;清理液(Reagent F)和 EMS溶液保存在4℃冰箱里;染色液(Reagent G)保存在室温下; EMS溶液具有毒性,注意操作安全。有效保证6

 

用户自备

 甲磺酸乙酯(EMS)细胞突变诱导试剂盒产品说明书

25cm2细胞培养瓶:用于培养细胞的容器

75cm2细胞培养瓶:用于培养细胞的容器

 DMEM*细胞培养基(12052:用于细胞培养的营养基

胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(12024):用于细胞脱离

血细胞计数器:用于细胞计量

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