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柱层析填料操作方法的选择和操作规程介绍

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2021/6/23 17:01:02
    柱层析填料操作方法的选择:
  目前,柱色谱分离的操作方式,主要包括常压分离、减压分离和加压分离3种模式。常压分离是简单的分离模式方便、简单,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发,并且有时在柱子外面会有水汽凝结,以及有些易分解的化合物也难以得到,而且还必须同时使用水泵或真空泵抽气。加压分离可以加快淋洗剂的流动速度,缩短样品的洗脱时间,是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗液更快洗脱。压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵等。
 
  柱层析填料操作规程层析柱和凝胶填料是我们实验室的宝贵财富,为了方便大家使用和规范实验室操作,现将使用规范规定如下:
  1、使用前先明确自己的分离目的,即要做哪一方面的分离,从而选择合适的凝胶填料,请大家务必查阅文献,同时根据自己的分离要求,选择合适长度和直径的层析柱;
 
  2、选择好层析柱和填料以后,严格按照填料的要求来操作,包括填料的溶胀、脱气、装柱,期间务必严格按照说明书操作;
 
  3、适当控制上样量,上样以前务必要过0.22µm滤膜;
 
  4、选择合适的流动相,根据胶的性质决定能否用泵加压;
 
  5、使用完毕后,请将层析柱做好处理,将层析柱堵好,以防干胶或者进气泡,同时请做好试验纪录,以便下次用时方便查询使用情况;
 
  6、试验过程中所有用水或者溶液须经过抽滤和脱气,严防气泡。

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