尺寸排阻法的最大课题是分离条件的确立。广泛普及的聚苯乙烯和中性糖的分离虽然可以使用公示的方法实施,但是分析各种样品时,很难得到重现性高的数据。
影响尺寸排阻色谱法分离的因素有以下几点:
1、离子性聚合物分析时由于离子链的伸缩,会对洗脱体积有影响。很难得到重现性号的谱图时,必须先考虑这个原因。请参考含离子性的亲水性聚合物分析。
2、样品分子内部由于离子排阻而使分子链变大。
3、和填料产生离子排阻的情况。
尺寸排阻色谱柱是一款超高效液相尺寸排阻色谱柱,粒径为2 um,由表面键合二醇基的硅胶颗粒充填,主要针对小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分离分析而开发。
尺寸排阻色谱柱的保存:日常使用中,Sepax SEC色谱柱建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中(pH7.0)。如长期不用时,可将色谱柱保存至20%乙醇中,以防止菌体污染。(注:可根据具体使用条件选择保存方式,如实验条件为缓冲盐体系,建议保存在150mM磷酸盐缓冲液中,pH 7.0。若实验条件为有机溶剂体系,建议保存在20%乙醇中。)