可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计。其工作原理:物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 为吸光度;
I0为入射的单色光强度;
I 为透射的单色光强度;
T 为物质的透射率;
k 为摩尔吸收系数;
L 为被分析物质的光程,即比色皿的边长;
c 为物质的浓度。
可见分光光度计对使用环境的要求:
1、避开阳光直射的场所和有较大气流流动的场所。
2、请不要安放在有腐蚀性气体及灰尘多的场所。
3、应避开有强烈振动和持续振动的场所。
4、应远离发出磁场、电场和高频电磁波的电气装置。
5、仪器应放在可载重的稳定水平台面上,仪器背部距墙壁至少15cm以上,以保持有效的通风散热。