化学发光作为一种分析工具的吸引之处就在于检测的简单性。化学发光的实质是自身发光,这意味着化学发光的分析测试仪器只需要提供一种可以检测光信号和纪录结果的方法就可以了。自发光检测仪需要一个闭光的样品室和光检测器。检测器对光谱的敏感性近可能接近化学发光的光谱,以得到*大化的灵敏度。一般在自发光仪中的光电倍增管对蓝光有*佳的反应,对红光的末端光谱不太敏感。而固态检测器对红光有较好的反应。
化学发光(ChemiLuminescence ,简称为 CL)分析法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光( 光辐射 )所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光,必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单反应步骤的化学反应。化学发光体系用化学式表示为:
化学发光的种类:
1) 酶促反应的发光底物 是指经酶的降解作用而发出光的一类发光底物,目前化学发光酶免疫技术中常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。
2) 直接化学发光剂 这类发光剂不需酶的催化作用,只需改变溶液的pH等条件就能发光的物质,如吖啶酯(acridinium, AE)在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。
3) 电化学发光剂 是指通过在电极表面进行电化学反应而发出光的物质。