赛默飞紫外分光光度计的工作原理：
紫外分光光度法定量测定的依据是比耳定律，即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。许多有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱，因此可用紫外分光光度法对有机物质进行定性鉴定，结构分析及定量测定.其基本工作原理和红外光谱仪相似，利用一定频率的紫外--可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内，对于一个特定的波长，吸收的程度正比于试样中该成分的浓度，因此测量光谱可以进行定性分析，而且根据吸收与已知浓度的标样的比较，还能进行定量分析。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
赛默飞紫外分光光度计的检测过程：
光线穿过样品后，检测器用于将光线转换为可读的电子信号。通常，探测器基于光电涂层或半导体。
光电涂层在暴露于光喷出带负电荷的电子。当电子被射出时，会产生与光强成正比的电流。光电倍增管(PMT)是紫外-可见光谱中较常用的检测器之一。PMT基于光电效应，在曝光时首先发射电子，随后发射的电子依次倍增以产生更大的电流。PMT检测器对于检测非常低的光强度特别有用。
当半导体暴露在光下时，可以通过与光强成正比的电流。更具体地说，光电二极管和电荷耦合器件(CCD)是两种常见的基于半导体技术的检测器。
使用任何探测器产生电流后，信号就会被识别并输出到计算机或屏幕上。
