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Tris缓冲液的优缺点与应用方法

上海远慕生物科技有限公司

2022/1/21 11:23:54

Tris中文品名为三羟甲基氨基甲烷; 氨基丁三醇;缓血酸胺;2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇。是一种白色结晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于乙mi、四氯化碳,对铜、铝有腐蚀作用,有刺激性的化学物质。

Tris有很高的缓冲能力,在水中溶解度高,对很多酶反应是惰性的,使Tris成为用于许多生化目的非常满意的缓冲液。一般用于稳定反应体系的pH,在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力。

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Tris缓冲液的优点:
1. 因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;
2. 对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

Tris缓冲液的缺点:
1. 缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;
2.温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,△pKa/℃=-0.031,4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃;
3. 易吸收空气中的CO2,所以配置的缓冲液要盖严密封;
4.此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

Tris缓冲溶液的应用:
在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系稳定pH值;在凝胶中使用Tris-HCl缓冲体系稳定pH值;被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂;Tris缓冲液的低离子强度特点还可用于线虫的中间纤维的形成;在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”,可用于DNA的稳定和存储;将调节pH值的酸溶液换成乙酸,获得“TAE缓冲液”,换成硼酸可获得TBE缓冲液。这两种缓冲液常用于核酸电泳实验中。

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