反相填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。 反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。 样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有 更强的保留。 常用的反相填料有YMC C18填料(ODS)，C8(MOS)，C4(B)，C6H5(Phenyl)等。
聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要优点是在PH值为1～ 14均可使用。 相对与硅胶基质的YMC C18填料，这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白 质等样品的分离非常有效。 现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。
反相填料的较大特性是具有非常高的表面键合覆盖率，是不同性质有机化合物分离的理想选择。通过在生产过程中的严格控制，使之*封尾，对酸性和碱性以及螯合物样品具有*的分离性能。反相填料采用自主开发的球形多孔硅胶生产工艺，并对硅胶的硅烷化反应进行了系统研究，建立起了制备球形液相反相填料的优化条件。所生产的球形多孔硅胶具有粒径分布均匀，孔径分布范围窄，比表面积可控，表面官能团浓度高和机械强度高等特点，完满足现代液相色谱的要求。
反相填料在干燥状态下为透明无孔凝胶，但是通过有机溶剂溶胀后可以变成具有分子筛性能的多孔网状结构，凝胶填料*溶胀后，孔径和排阻极限由交联度和洗脱剂决定。可以在苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、四氯化碳、二甲基甲酰胺酮及混合有机溶剂中溶胀分离。可用于亲脂性多聚物和有机洗脱溶质的分子量、结构类似物体积排阻层析，也可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子同系物。
