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2022/3/21 14:52:29UHPLC是一种专门的色谱方法,与 HPLC 相比,它运行速度更快、分辨率更好并且使用的溶剂更少。UHPLC 通过使用填充较小颗粒(通常直径小于 2 µm)的较小色谱柱来实现这一点。生物化学、细胞和分子生物学、临床医学和许多其他领域的研究人员依靠 UHPLC 从混合物中分离不同类型的分子——无论这些分子是蛋白质、肽、代谢物、药物化合物还是其他化学物质。
尽管 UHPLC 的性能明显更好,但它并不总是*。在您考虑改用 UHPLC 时,恒谱生将帮助您区分重要和不重要的内容。
一、为什么选择 UHPLC?
尽管 UHPLC 和 HPLC 在各种情况下都有优势,但如果您在五分钟内分离两种组分并且每天只进行几次分析,则不太可能需要 UHPLC,因为 HPLC 的分离度既足够又相对快速。
即使您不需要更高的分离能力,UHPLC 仍然可以提高您的通量。与 HPLC 色谱柱相比,uhplc更高的色谱分离度可用于提高复杂样品的分离能力,或通过使用更短的色谱柱并保持分离度来提高分析速度。
二、然而,UHPLC 并非*。由于 UHPLC 在色谱柱中使用较小的颗粒,因此不适用于脏污或未过滤的样品。使用未过滤的样品可能会导致色谱柱堵塞。可以使用恒谱生在线过滤器或者保护柱安装在柱前进行过滤,避免色谱柱堵塞。通常,UHPLC 需要更高的样品和流动相清洁度,这会增加溶剂和样品制备的额外开销。
三、选择 UHPLC 的注意事项
因为 UHPLC 在色谱柱内使用较小的颗粒,例如,需要更大的力来驱动溶剂和样品通过色谱柱。因此,UHPLC 需要能够在比 HPLC 中使用的泵更高的压力下工作的泵。
另一方面,虽然 UHPLC 系统的初始成本通常高于其对应的 HPLC 系统,但总体拥有成本实际上可能更低。与 HPLC 系统相比,UHPLC 系统可以用更少的试剂产生更快的结果,并且增加的通量可以提高生产力。在这种情况下,UHPLC 系统较高的初始成本实际上可能会在几年内节省实验室资金。
四、未来发展
尽管存在差异,但新型柱填料开始模糊 HPLC 和 UHPLC 之间的界限。例如,对于 HPLC 和 UHPLC,新的“核壳”或“多孔”颗粒提供比传统柱颗粒更好的性能。核壳颗粒具有更大的表面积,这意味着它们在较低的工作压力下优于传统的颗粒表亲。这意味着使用核壳颗粒(例如来自恒谱生的核壳颗粒填料,批次稳定性一致,可重复利用),现在可以使用 HPLC 的较低压力实现 UHPLC 的“超”效率。
对于 HPLC 和 UHPLC,平衡设备成本和性能变得更加灵活。无论您需要简单的高通量分离还是更高的分离能力,UHPLC 都在不断发展以满足比以往更多类型的需求