流式细胞仪是集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细胞。
活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下,活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。一、流式细胞仪的潜在应用,流式细胞术的潜在应用非常多,包括检测和测量:
1.蛋白质表达 - 遍及所有细胞,包括细胞核内。
2.蛋白质转译后修饰 - 包括剪切和磷酸化蛋白质。
3.RNA - 包括IncRNA、 miRNA和mRNA转录物。
4.细胞健康状态 - 从存活率到晚期凋亡或程序化细胞死亡。
5.细胞周期状态 - 是评估细胞处于G0/G1期、S期、G2期或多倍体状态的强大工具,包括分析细胞凋亡和活化。
6.鉴定和表征异质样本中的不同细胞亚群 - 包括区分中枢效应记忆细胞和耗竭T细胞或调节性T细胞。
二、流式细胞仪的三个主要元件是流体学、光学和电子学系统:
1.流式细胞仪的流体系统负责将样品从样品管转移到流动池。一旦通过流动池(并通过激光束),样品将被分选出来(在细胞分选仪中)或移到废液中。
2.光学系统的元件包括激发光源、透镜和滤光片(用于收集和移动仪器周围的光)以及用于产生光电流的检测系统。
3.电子系统是流式细胞仪的大脑。在这里,来自检测器的光电流经过数字化、处理和保存,以用于后续分析。