程序降温盒内异丙醇的量必须高于刻度线；冻存5次后异丙醇需要更换一次，以免影响冻存效果。细胞冻存后应取出一管复苏，检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存，为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养，观察细胞生长情况，再继续冻存。冻存细胞十分脆弱，必须轻柔操作。除少数对冷冻保护剂（DMSO或甘油）敏感的细胞，绝大部分细胞在解冻之后，可直接接种到*培养基中，隔天再换新鲜培养基以去除DMSO 和死细胞，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴壁的问题，也可因不离心，减少了操作步骤，降低污染的几率。
关于程序降温盒，您不得不知道的这些事儿！
程序降温盒要不要加异丙醇？
不需要。利用自身*设计进行降温：内层金属合金芯快速降温-外曾绝缘聚乙烯泡沫隔热的相互配合达到平衡，实现-1摄氏度/min。不用异丙醇意味着多批次冻存效果没有差异，且费用低（无需每五次更换异丙醇），无有害废弃物。同时无需预冷，盖子不冻粘，当从冰箱里拿出冻存盒时不会冻到手指。
当把冷冻样品从取出保存时，冻存管是否一定要放在干冰上而不是普通的冰上?
细胞冻存管从 取出后，必须尽快的转移到液氮中进行存储。在液氮存储之前，如果冰箱距离液氮位置较远或需要较长时间转移，为了保持细胞低温冷冻的状态，我们推荐将细胞放在-78°C干冰上；若将细胞冻存管放置在普通的冰上，冻存管温度会显著升高，降低细胞解冻后的活力和功能。这个问题的答案同样适用于其它程序降温盒或冻存方式。
循环使用间隔的时间？
5-10min。细胞取出放到液氮后，可将金属合金芯取出，室温下10min左右就可升到室温。如需要更快速度，也可以将金属合金芯放入37度水浴锅，可在非常短的时间内升温。在使用前别忘了用酒精擦拭消毒，确保干燥且无菌。
