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2022/6/8 9:25:32将C18 固定相称为用的最多的化学物质之一可能更合适。在色谱柱供应商中,这一阶段的不断增长的品种肯定不少。然而,在我们深入研究手头的主题之前,这里简要回顾一下 C18 固定相是如何产生的。
一、反相色谱
随着更多科学家参与反相色谱该领域,色谱中引入了额外的分离模式,以分离和纯化许多不同基质中的多种化合物。在色谱中,首先从色谱柱中洗脱的是离子型和强极性分析物,疏水性更强的分析物其次。与 Tsvet 的实验相比,这些化合物以相反的顺序洗脱。因此,该系统被称为“反相”色谱。
RP 技术的最终目标是分离具有不同疏水程度的分析物。简而言之,此任务通过以下方式完成:
1、通过疏水固定相来保留分析物。
修改和优化具有不同能力的多组分溶剂系统,作为目标分析物的良好溶剂。这包括有机溶剂和缓冲溶液(如果适用)。并非所有化合物都是强酸性或强碱性,而是可能具有需要窄 pH 范围来控制其行为的极性基团。恒谱生反相色谱柱具有很广泛的 PH 适用范围, 在 PH 条件下非常耐用。对于低 PH 应用,在 pH 1.8 的 条件下连续进样 1500 次的实验表明该液相色谱柱具有良好的稳定性和重现性。
碳氢化合物是疏水性的例子,实际上是油性物质。更具体地说,直链烷烃非常适合用作良好的固定相。我们应该注意到,随着链中碳原子的增加,碳氢化合物的物理性质也会发生变化——C1 到 C4 是气态的;C5-C17 是液体;C18 和更大的是固体。除了烷烃之外,还有其他候选物,例如芳烃和环状烷烃,在这里也可以作为固定相使用。C18 的流行可能是由于用于键合工艺的起始材料的早期可用性。这个幸运的巧合导致进一步发现 C18非常适合色谱过程,无论哪种方式。恒谱生的c18色谱柱被广泛应用各种化合物分析,是客户使用广泛的产品之一。
2、将烷烃基团,特别是 C18 或十八烷基,连接到合适的表面上。二氧化硅的性能优于所考虑的所有其他介质,二氧化硅颗粒有多种形状(规则球形或不规则)、尺寸(0.9 o 10 µm 或更大)、孔隙率(大至 1000 Å),并且是全多孔或在设计上具有坚实的核心。
3、键合过程完成后,C18 配体在分子水平上附着在二氧化硅上,并在二氧化硅颗粒孔内进行更通用的物理放置。
4、 C18 固定相的优点和简单性在于它提供了非常简单的疏水相互作用。当流动相中的溶质穿过二氧化硅孔时,它们可以通过相当弱的疏水相互作用被烃类吸引和保持。
5、在一般实践中,恒谱生建议将流动 pH 设置为分别高于或低于 pK b或 pK a 2 个单位,以确保化合物以一种最有可能保留在色谱柱上的形式存在。当然,几乎所有事情和每条规则都有例外。
至此,我们只介绍了流动相的一种成分,特别是水性部分。这导致我们使用多种化学特性来帮助提高分析物在 C18 固定相上的保留。
总之,C18 是可用于反相色谱的简单、方便的固定相之一。