在线色谱仪色谱柱的选择要遵循怎样的原则?
1、气相色谱柱按其尺寸和内径分为毛细管色谱空心柱和填充色谱柱;根据色谱柱中固定相的种类,色谱柱可分为吸附柱和分布柱。
2、固定液的选择和固定液的配比。样品在色谱柱中两相之间的分布行为取决于样品和固定液中各组分的性质。因此,固定液对样品能否有效分离起着决定性的作用。固定液的选择是在基本原则的指导下,根据操作者的实际经验进行的。选择固定溶液的一般原则是“相溶性相近”。
(1)固定液的选择:分离非极性组分时,通常使用非极性固定相。各组分按沸点顺序出峰,低沸点组分先出峰;分离极性组分时,一般使用极性固定溶液。各组分按极性顺序流出色谱柱,极性小则峰先出;为了分离非极性和极性混合物,通常使用极性固定液体。此时,非极性(或易极化)成分将达到峰值;对于醇、胺、水等强极性和氢键化合物的分离,通常选择极性或氢键固定溶液;对于成分复杂、分离困难的样品,通常使用特殊的固定液或混合固定相。
(2)固定液比例的选择,固定液在载体上的涂布量,一般是指固定液与载体的百分比。该比率通常在5%和25%之间。比值越低,在载体上形成的液膜越薄,传质阻力越小,柱效越高,分析速度越快。比值低时,固定相负荷低,允许喷射量小。通常,在分析工作中选择较低的比率。
3、分离柱长度和柱内径的选择。填充色谱柱的柱长和内径通常为1~3M和3~4mm,材质有玻璃、石英玻璃和不锈钢(常用)。增加柱长有利于提高分离度,但组分保留时间增加,柱阻增大,操作不便。柱长的选择原则是在满足分离目的的前提下尽量选择较短的柱子,有利于缩短分析时间。空心毛细管色谱柱的选择原理类似,但空心毛细管色谱柱没有固定液比的理论,但液层厚度一般在0.1~0.6um之间,液层较薄,柱效为高,但柱容量小。
4、在线色谱仪色谱柱的选择原则:在满足分析要求的情况下,先装柱,后装毛细管柱;选择毛细管柱,然后是大口径,然后是小口径;列长度越短越好。固定相用量越少越好;无极性优于极性,使用温度越高越好。自稳定性好,抗污染能力强,老化、活化再生简单,时间短,使用周期长。