荧光酶标仪一般是由光学系统、单色器系统、样品室、探测器和检测系统构成,简单来说,光源发射的光束通过单色器系统处理后穿过整个样品,部分的未被样品吸收的光抵达光电检测器当中,经过信号处理后,反馈在仪器显示屏上。
基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体,此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应,并牢固地结合形成仍保持活性的免疫复合物。
荧光酶标仪测定是在特定波长下,检测被测物的吸光值。随着检测方式的发展,拥有多种检测模式的荧光酶标仪叫做多功能酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。
荧光酶标仪的核心是由全光谱光学分光系统和9通道光学快速测量模块组成。准确率高,技术先进,操作简单,分析精确,仪器使用覆盖面广。广泛适用于科研单位,食品安全检测领域,高等教育学院实验室,医疗检验,农业畜牧系统实验室。该仪器的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间,在快速读取模式下,整板读取仅需10秒。检测速度快,有利于提高检测的精密度,可有效避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。
在使用荧光酶标仪的时候,我们应该注意这些方面:
一、外观
酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
二、酶标仪的稳定性漂移、
选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测量标称值为1.0A的光谱中性滤光片测量操作按仪器说明进行、,记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测量值之差不应超过±0.00。
三、吸光度测量的准确度
选用405,492和620nm波长,以空气为参比,分别测量标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测量3次,按下式计算准确度:AA=1/3A、+A。+A3、—A:A:为标准值。