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CLOVER呕吐毒素亲和柱的IAC-SEP原理和使用注意事项

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2022/7/26 10:04:48

 

呕吐毒素亲和柱的原理和使用注意事项

原理

样品经提取液提取、过滤、稀释,然后通过键合有呕吐毒素特殊抗体的免疫亲和柱。此时,呕吐毒素被亲和柱中的抗体特异性的吸附,用水或缓冲液将免疫亲和柱IAC-SEP上的杂质除去,然后用甲醇使抗体变性,从而将呕吐毒素从亲和柱上洗脱下来。最后,用HPLC或荧光计进行定量检测

注意事项

  1. 使用前,免疫亲和柱需回至室温(2225℃)。

  2. 样品添加回收试验时,标准品添加到样品中,静置2小时后或过夜,再进行样品前处理,否则会出现回收率偏低的现象。

3)     操作步骤中,样品过柱,淋洗,洗脱时,一定要控制好流速,不能太快,否则会使检测结果偏低。

4)     如果将标准品直接过柱验证回收率时,一定要确保标准上柱液中甲醇浓度不要超过5%,否则会影响柱子的吸附能力。

5)     试验中使用的玻璃仪器等,一定要清洗干净,尤其是用次氯酸等处理过的仪器,否则会使检测结果偏低。

6)     当用氮气浓缩洗脱液时,氮气流不要太大,否则会损失部分呕吐毒素。

 

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