呕吐毒素亲和柱的原理和使用注意事项

原理

样品经提取液提取、过滤、稀释，然后通过键合有呕吐毒素特殊抗体的免疫亲和柱。此时，呕吐毒素被亲和柱中的抗体特异性的吸附，用水或缓冲液将免疫亲和柱IAC-SEP上的杂质除去，然后用甲醇使抗体变性，从而将呕吐毒素从亲和柱上洗脱下来。最后，用HPLC或荧光计进行定量检测

注意事项

1. 使用前，免疫亲和柱需回至室温（22～25℃）。

2. 样品添加回收试验时，标准品添加到样品中，静置2小时后或过夜，再进行样品前处理，否则会出现回收率偏低的现象。

3)     操作步骤中，样品过柱，淋洗，洗脱时，一定要控制好流速，不能太快，否则会使检测结果偏低。

4)     如果将标准品直接过柱验证回收率时，一定要确保标准上柱液中甲醇浓度不要超过5%，否则会影响柱子的吸附能力。

5)     试验中使用的玻璃仪器等，一定要清洗干净，尤其是用次氯酸等处理过的仪器，否则会使检测结果偏低。

6)     当用氮气浓缩洗脱液时，氮气流不要太大，否则会损失部分呕吐毒素。