蒸发光检测器(evaporativelight—scatteringdetector,E1SD)是一种薪型的通用型质量检测器,它的通用检测原理克服了常见于HPLC传统检测方法的不足,已越来越多地应用于HPLC、超临界色谱和逆流色谱中。本文主要简介蒸发光散射检测器的工作原理与特点及影响因素。
I)ELSD的工作原理
ELSD的检测原理ELSD运行有三个过程:第一是雾化过程,用惰性气体或净化空气将色谱柱流出物雾化;第二是蒸发过程,在一个加热管(漂移管)中将流动相挥发;第三是检测过程,测定留下来的样品颗粒的光散射。所有商品ELSD都由一种或两种模式完成这三个过程。模式A的操作是全部柱流出物(气溶胶)都进入直的漂移管,让流动相在其中蒸发。模式B中是将气溶胶通过一个弯管,在此管中大的颗粒沉积下来流入废气管,其余的小颗粒进入螺旋状的漂移管。在上述两种模式中,样品颗粒均进入光管,使激光发生散射而得以检测。目前市场上商品的ELSD的光源分为两种,一种以激光作为光源,另一种以钨灯作为光源。
II)ELSD检测的优点及缺点
ELSD可作为高效液相色谱(HPLC)、高速逆流色谱(HSCCC)、超临界流体色谱(SFC)等色谱的检测器。作为新型的通用型检测器,它具有许多优点:首先,ESLD检测不依赖于样品的光学性质,只要挥发性小于流动相的物质,都可以在ELSD上产生响应。其次,ELSD可以很好的支持梯度洗脱,蒸发光散射检测可以消除流动相配比变化对基线产生的影响。另外,与示差检测器及紫外低波长检测相比,ELSD具有较好的灵敏度。
但是,相对于UV检测器,ELSD检测也有一定的特殊性。ELSD检测要求流动相及流动相中加入的修饰剂必须有良好的挥发性,这样就使非挥发性的缓冲盐的应用受到了限制。另外,与UV检测器相比,ELSD检测的灵敏度不是足够的理想。
III)影响ELSD检测性能的基本因素
操作模式的选择,选择合适的操作模式可提高方法的灵敏度,操作模式的选择取决于样品的挥发性、流动相的组成及其流速。
流动相组成及流速的选择,流动相的挥发性越好,方法的灵敏度越高。流动相的流速越低,相应的信号越强。漂移管温度对基线水平和噪音的影响并无明显的规律性。优温度应为在流动相基本挥发的基础上,产生可接受噪音的低温度。载气流速是影响检测性能的一个很重要的因素。优载气流速应是在可接受噪音的基础上(例如05mV),产生最大检测响应值时的低流速。