远慕分享生物实验中常用电泳方法

 一、纸电泳 

指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最早使用的区带电泳。

将滤纸条水平地架设在两个装有缓冲溶液的容器之间，样品点于滤纸中央。当滤纸条被缓冲液润湿后，再盖上绝缘密封罩，即可由电泳电源输入直流电压（100V～1000V）进行电泳。

二、醋酸纤维素薄膜电泳

电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的特点是分离速度快、电泳时间短、样品用量少。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。

三、凝胶电泳

由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持物进行电泳的方式。

凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯/酰胺凝胶电泳是普通电泳中应用最多的两种形式。

目前，这种办法被广泛用来分析蛋白质和核酸。

四、等电聚焦电泳

1．等电聚焦电泳过程  

一种利用有pH值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。

在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液（两性载体电解质）中进行分离，每一种被分离的两性物质都移向与它的等电点相一致的pH位置，在那里不再移动（称为聚焦）。

2．等电聚焦电泳的特点

①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、连续、线性的pH梯度；

②由于“聚焦效应”，即使很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；

③电泳速度快;④分辨率高;

⑤加入样品的位置可任意选择；

⑥可用于测定蛋白质类物质的等电点;

⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分离分析。

五、等速电泳

采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分，尾随电解质则低于任何样品组分，被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间，在强电场的作用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中移动，实现分离。

六、双向凝胶电泳（二维电泳）

第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离。

第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯/酰胺凝胶电泳 （SDS-PAGE）就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状。

七、免疫电泳

免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开；然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。