主要用途 乳酸脱氢酶(LDH)释放法细胞繁殖与毒性定量检测试剂是一种旨在通过酶联连续反应系统检测由于细胞损 伤导致的细胞内稳定的乳酸脱氢酶释放到细胞外,使四唑盐染料碘硝基氯化四氮唑(INT)还原为红色甲臜 (farmazan),即比色法定量测定酶活性,以评价活体细胞繁殖的而经典的技术方法。该技术经过精心 研制、成功实验证明的。适用于各种药物、化学、环境因子和营养因子处理的贴壁或悬浮生长中的动物或人 体细胞。替代传统的同位素[51 Cr]释放检测的。产品严格无菌,即到即用,简捷敏感,性能稳定, 显色清晰,检测准确,重复性好。
产品内容
裂解液(Reagent A) 毫升 补充液(Reagent B) 毫升 反应液(Reagent C) 毫升 显色液(Reagent D) 毫升 终止液(Reagent E) 毫升 标准液(Reagent F) 微升(另购) 产品说明书
用户自备
96 孔细胞培养板:用于细胞操作的容器 细胞培养箱:用于孵育反应 孔板离心机:用于沉淀细胞 酶标仪:用于定量检测染色后的细胞
质量标准 1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定检测敏感
关键步骤
1. 本产品为 100 次(1 个 96 孔板)操作
2. 操作时须戴手套 3. 整个操作须无菌操作
4. 建议每个样品安排 3 个孔,即重复 3 次,计算时取其平均值
5. 检测体系相应增加,试剂用量按比例相应增加:例如 200 微升检测体系,试剂用量增加 1 倍
6. 每孔中的培养液需 100 微升,避免使用周边培养孔(常常液体蒸发而减少)
7. 系统测试,可以加入 10 微升标准液(Reagent G)到 50 微升无细胞的细胞培养液里,然后加入反应液 和显色液即可
8. 细胞裂解效果不佳,可以使用 20 微升裂解液(Reagent A)处理
9. 孵育时,须避光
10.染色完成后,建议即刻检测,最迟不得超过 1 小时
11.细胞培养和处理时,避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和 EDTA,否则影响检测的准 确性
12.血清含有乳酸脱氢酶,建议使用浓度不要超过 1%
13.细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大等因素会造成细胞自然释放乳酸脱氢酶
14.酚红会干扰检测
15.样品最大酶活性对照孔或最大 OD 吸光读数与细胞裂解程度密切相关
16.如果用户没有孔板离心机,则移取上清液时格外小心
17.如果用户没有匹配的波长,可以使用波长 470nm 至 570nm 之间的任一波长替代
18.本公司提供系列细胞繁殖检测试剂产品