染色液是适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比自身强20多倍的荧光。和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
染色液的使用说明:
1、将涂片加热固定,滴加石炭酸品红染色液,徐徐加热至蒸气出现,但切不可使沸腾。染色如因蒸发减少时,应随时添加。染5分钟,倾去剩余染液,水洗。
2、滴加3%盐酸-乙醇溶液脱色,直至无红色脱落为止,水洗。
3、滴加吕氏碱性美蓝溶液复染30秒~1分钟,水洗,待干镜检。
染色液的操作步骤:
1、按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、涂片:取待检细菌,于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水,取菌与水混合均匀,涂成薄层。
3、干燥:涂片后在室温下自然干燥,也可在酒精灯上略加温,使之迅速干燥。
4、固定:手持载玻片一端,标本面朝上,在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、初染:滴加结晶紫染色液染色,清水冲洗去染色液。
6、媒染:滴加碘液,并覆盖载玻片室温放置,水洗。
7、脱色:滴加脱色液摇动,直至流下的脱色液不出现紫色为止,立即用水冲去脱色液,终止反应。
8、复染:滴加沙黄染色液染色,水洗。
9、干燥。镜检:置油镜观察。