血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可很大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉采血。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。
应如何为你的细胞选购FBS呢?选购FBS应考虑哪些标准?
1、血源可追溯性
选择来源安全、可追溯的FBS对于细胞培养来说至关重要。目前市面上存在较多以假乱真的FBS产品,科研工作者对血清的真实产地、来源难以鉴别。对此,国际血清行业协会(ISIA)实施了供应链可追溯性的行业标准,以确保FBS的质量和安全性。例如,FBS供应商是否保留原产地的可追溯记录?是否持有血清生产各阶段处理、运输和商业交易的文件?这些都是判断FBS可追溯性需要考虑的因素。
2、产品检测
每款FBS在生产上市之前,必须经过严格的质控检测。
质控环节不可少,以确保上市的血清符合规定合乎规格,而血清产品分析证书(COA)就是FBS质控的重要体现。在COA中,常规的检测指标包括内毒素、总蛋白、细菌、病毒等,例如我国药典规定,FBS中内毒素含量应≤10EU/mL,另外总蛋白为30-50mg/mL、血红蛋白检测不高于30mg/dL。
3、质量验证
我们使用FBS目的是为了让细胞更真实、健康地生长。在确保了FBS的来源真实性、安全可靠性后,下一步就要对FBS的质量,即培养细胞的效果进行鉴定了,而这也是决定细胞能否养好的关键。
在细胞培养过程,质量粗糙的FBS可能会导致细胞出现生长速度缓慢、不贴壁、容易老化等现象,从而导致实验受阻。经过质量验证的FBS,则可以十分确定这款FBS对哪些细胞具有良好的培养效果,进而判断其能否把自己的细胞养好。对于质量优质的FBS,通常采用血清敏感性细胞(如干细胞)来进行培养验证,若培养效果良好,则其他常规细胞系的培养就更不在话下。
4、稳定性
FBS作为其他行业的副产品,其生产在本质上会受到天气、食物供应、经济条件和牛群规模及疫情等各种因素的影响,导致血清的供应可能出现货源、价格及批次间的不稳定性,从而造成实验的不顺甚至实验失败。在过去,国内外已有多个实验室出现过因血清批间差异大而导致实验结果无法重复的情况,浪费了巨大的时间和金钱成本。
因此,找到稳定提供同批次FBS的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,而且花在重复实验或检验新批次上的时间将大大减少。