大赛璐手性柱还包括反相的系列,同时键合相的手性柱正相和反相都能用,只是要求在正相和反相流动相之间进行切换的时候要用异丙醇小流速的过渡,因为大赛璐手性柱压力都不能超过100bar。
手性分离重要的是选择一根好的手性柱,做手性分析的都知道,大赛璐的手性柱目前占有率高,根据用途分为多种不同的型号,大家熟悉的可能是OD-H。
另外需要注意的是键合相手性柱的记忆效应,即流动相使用不同种类的溶剂切换时,柱效可能会下降,解决方法就是用DMF做溶剂对色谱柱进行清洗。反相常用的溶剂包括水、甲醇、乙腈和乙醇,每种溶剂都为样品分离提供了选择性。
有四种填料,结构类似,对应的色谱柱分别是OD、AD、OJ和AS,粒径10um,后来填料粒径变为5um,就是卖的多、使用范围广的柱子,号称四大金刚,分别是OD-H、AD-H、OJ-H和AS-H,在柱子名称后边加“-H”,这些柱子都只能做正相使用。
手性固定相分为π电子接受型和π电子提供型两类。常见的π电子接受型固定相是由(R)-N-3,5-二硝基苯甲酰苯基甘氨酸键合到γ-氨丙基硅胶上的制成。此类刷型手性色谱柱可以分离许多可提供π电子的芳香族化合物,或用氯化萘酚等对化合物进行衍生化后进行手性分离。
π电子供给型固定相常见的是共价结合到硅胶上的萘基氨基酸衍生物,这种固定相要求被分析物具有π电子接受基团,例如二硝基苯甲酰基。醇类、羧酸类、胺类等,可以用氯化二硝基苯甲酰、异腈酸盐、或二硝基苯胺等进行衍生化后,用π电子供给型固定相达到手性分离。