培养细胞最担心的就是细胞污染，这期继续分享如何辨别细胞污染的经验。
★识别支原体污染
这是一种很难发现却经常存在的问题。
支原体是最小的（0.3 μm）能够自我复制的有机体，倒置显微镜下通常观察不到。
支原体没有细胞壁，对常用的抗生素不敏感。支原体感染是极为不易察觉的，可能直到出现了可以观察到的病变或发现细胞正常功能丧失的时候，才意识到是发生了支原体感染。
在没有采用特殊的染色方法，也没有观察到病变的情况下，实验总是不成功，就应怀疑被支原体污染。预防支原体污染的惟-途径是经常对细胞进行筛选。
★防止支原体感染
只使用那些证明没有污染支原体的血清和培养基。
只接受那些保证没有支原体感染的细胞。
注意：当你怎么样也得不到一种细胞表面蛋白的抗体，或不能有效地表达某种蛋白质时，可能是由于使用了被支原体感染的细胞。
★检测支原体感染
如果这株细胞对你十分重要，那么就应该每4~6周对细胞进行检测，通常使用下面几种方法：
●支原体的荧光染色是简单、便宜也是常用的方法。
●使用支原体的特异引物进行PCR检测。如果实验室具备PCR仪和电泳条件，那么这种方法可能是尤为简单的手段。可以自己设计引物（设计好恰当的对照），也可以从公司购买引物。
●把细胞样品送到能进行支原体检测的公司检测。这样做虽不如自己检测快（尽管托给公司比较容易，但会很贵），只有一个好处就算是不用自己亲自动手。
注意：如果你发现了支原体污染
●合适的方法是立即把细胞丢弃，从新复苏。
●可以不理会它。
●可以采取某些挽救措施，但是会很困难，只适用于那些不可代替的细胞。简单的方法是订购除去支原体的试剂盒。
★交叉污染
细胞还可能被别的细胞污染，这种交叉污染可能更广泛，许多实验人员在不经意之间培养、使用和冻存了其他的细胞。
如何避免交叉污染：
●只从有保障的地方得到细胞，或者自已检查细胞。
●不要同时操作多株细胞。不要把多种培养瓶同时放在超净台内。
●不要使用同一个移液管操作多种细胞。
●不同细胞株不要使用同一瓶培养基或胰蛋白酶。
●操作后不要把移液管放回培养基的瓶中。
●培养维护时，使用栓塞式移液管。
注意：
如果你的细胞生长情况或功能突然发生了变化，在排除支原体污染后，检查你的细胞是否发生了交叉污染（这些变化也可能是发生了突变或漂变）。
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