氯化血红素的检测方法

关于氯化血红素检测方法的文章及报道主要有紫外光谱法、荧光法、红外光谱法、极谱法、可见光分光光度法、电极法等。

紫外和红外光谱法

两种光谱法原理类似，均是利用标准品与样品的红外光扫描谱图和紫外光扫描谱图进行比对，对图谱的走向以及变化趋势进行比较。在红外光扫描谱图中，如果样品与标准品具有相同的吸收特征，扫描谱图形状大体一致，可以以此说明试验所得样品为氯化血红素。在紫外光扫描谱图中，标准品在波长为 380-410nm 范围内有最大吸收，但是因为溶剂的不同，会导致标准品的最大吸收波长也不同。在相同实验条件下，如果样品在同一波长处具有最大吸收，该方法可作为氯化血红素的定性鉴定。袁曦对氯化血红素口服液采用紫外光谱法对其氯化血红素含量进行检测，采用波长为384nm 处对抗贫口服中的氯化血红素进行测定，结果表明在1.80-9.10ug/mL 线性范围内，R=0.9999，标准差是 0.67%，方法的平均回收率达到99.3%。

荧光法

荧光法是利用血红素中卟啉的荧光特性，利用荧光光度计可检测出样本的荧光强度，从而计算其相应的血红素含量，如粪便中血红素的定量测定，血红蛋白在肠道中消解为血红素，血红素在肠道内细菌的作用下，大部分被消解为卟啉，利用卟啉的荧光特性，可计算其相应的血红素含量。血红素与草酸试剂共热能脱去亚铁离子，并被还原成具有荧光特性的卟啉，此条件下利用荧光法所测得的卟啉为肠道中全部的血红素量。消解的血红素除以血红素总量即为血红素肠道转换率，由于出血部位越高，被消化吸收的时候越长，肠道的转换率也越高，所以从肠道转换率可以大概推算出肠道出血的部位。

可见光分光光度法

将血红素溶解于 0.25%Na2CO3溶液中，在波长为 610nm 处有最大吸收峰值，杨淑琴在血红素的盐酸丙酮法提取工艺中有用该法对血红素的含量作了测定。

极谱法

通过研究血红素的极谱行为，以0.1mol/L NH3-NHCl 作为缓冲溶液，血红素在-0.42V点出现一个灵敏的阴极波。利用该方法可检测出zuidi血红素浓度为8×10mol/L。

电极法

该法采用修饰后的石墨电极检测血红素，发现电极对血红素的浓度反应比较灵敏，浓度在 1×10～1×10mol/L范围内血红素与电极反应成线性关系。

其他

除了上面的方法外，还有一些关于测定氯化血红素的方法。袁曦在水浴加热加热条件下利用氢氧化钠溶液将氯化血红素溶解，冷却后加入硫酸，晃匀后立即产生棕色沉淀。过滤后取滤液加硫氰酸铵试液数滴，溶液呈棕红色。此显色反应可用作氯化血红素的定性检测。