冻存管一般用作实验室细胞的低温保藏。冻存管又名冷冻管,是常用的实验耗材,多用于生物、医药、食品等行业。
使用步骤:
⑴ 从细菌纯培养物中挑取新鲜培养物配成大约为3-4麦氏比浊度的菌悬液接种与菌种保存管中。
⑵ 拧紧保存管,来回颠倒4-5次使细菌乳化,不能旋摇。
⑶ 把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)
细胞冻存后如何复苏?
1. 细胞实验室进行常规消毒,紫外照射30 min以上,超净台开启通风10 min。
2. 将新鲜培养基置于37℃恒温水浴锅中回温,回温后喷以70 % 酒精并擦拭,移入无菌操作台内。将10 ml左右新鲜培养基移入无菌细胞培养瓶中,备用。
3. 从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入40℃水浴中,轻摇冷冻管使其在快速全部融化,以70 % 酒精擦拭冻存管外部,移入无菌操作台内。
4. 将细胞悬液移入已加培养基的细胞培养瓶中,放CO2培养箱中培养。
5. 待细胞贴壁后(根据细胞种类贴壁时间不同,一般4小时左右),弃去含有冷冻保护剂的培养基,加入新鲜培养基继续培养。