冻存培养基是一种特殊类型的培养基,其主要作用是保护微生物或细胞的生存状态,以便在需要时恢复其生长和繁殖。冻存培养基一般用于保存重要的微生物和细胞,比如医学上常用的细胞系、病毒、酵母菌、藻类以及其他微生物。
冻存培养基的作用主要体现在以下三个方面:
1.保护微生物或细胞的生存状态。由于冻存培养基中含有一定浓度的保护剂,可以有效地减轻冷冻过程中细胞膜的损伤,避免细胞的水分析解和脱水。此外,冻存培养基还可以降低低温对微生物或细胞的损伤,保持其新鲜度和活力。
2.便于保存和运输。利用冻存培养基可将微生物或细胞有效地保存,以便将来使用。通过冻存培养基,这些微生物或细胞能够固定在冰箱或其他低温设备中,且不需要快速运输,从而节省时间和成本。
3.保存长期性。冻存培养基可以同时保护和保存微生物或细胞的基本遗传特征。由于冻存条件下微生物或细胞的生长速度缓慢,所以其遗传信息的丰富性得到有效保护。在需要时,冻盒中的微生物或细胞可以被快速恢复到活动状态,以进行后续实验研究。
使用冻存培养基的方法主要有以下几个步骤:
1.选择适当的冻存培养基。根据不同微生物或细胞的需要选择不同类型的冻存培养基。一般经常使用的冻存培养基有10%DMSO复配液、15%glycerol液等。
2.培养微生物或细胞到足够的数量。根据需要将待保存的微生物或细胞从培养基中取出,进行培养和增殖,直到获得足够量的细胞。
3.加入冻存培养基。将冻存培养基加入细胞样品中,并充分振荡混合,以便将其充分保护,防止细胞冻结时发生膨胀和破裂。
4.制备冻存盒。将保存样品分装到冻存盒中。注意,每个盒子中的数量不宜过多,通常保持1-2ml为宜。标注盒子中保存的样品的种类和保存时间。
5.冷冻保存。将制备好的冻存盒快速转移到低温条件下,一般放置在液氮或其他低温设备中冷冻保存。