均质是获得菌群的方法之一,均质也称匀浆,是使悬浮液(或乳化液)体系中的分散物微粒化、均匀化的处理过程,这种处理同时起降低分散物尺度和提高分散物分布均匀性的作用。
均质中常用拍打式均质机又称无菌均质器,可以从固体样品中直接提取细菌。使用无菌均质袋,拍击的机械装置作用在均质袋上,不和样品直接接触,因此不会受污染。
拍打式均质机由于使用方便,不易受污染,使用越来越广泛。但其缺点是均质的力量不足,对于坚硬的样品不但无法均质均匀,还会引起均质袋的破损。
操作步骤
1、将样品放入无菌均质袋中(一般为25g)。
2、倒入225ml灭菌生理盐水或缓冲蛋白胨水,或根据检测要求,倒入标准中规定的液体培养基。
3、将装有样品的均质袋放入均质机中,均质袋的开口在关闭均质机时夹住。
4、设置参数(拍击速度、拍击时间等)。
5、扳下扳手,进行样品均质。
6、均质结束后,往上抬起扳手打开均质机门,取出样品均质袋。
注意事项
1、使用前先将电源插头固定牢靠后,再打开机器开关。插头不能使其出现松动,因为机器工作时会产生振动导致插头脱落。这种突然短点对机器会造成损伤。
2、拍打式均质机工作时不准随便打开均质机门,防止样液飞溅(有的均质机打开门以后自动停止拍击均质),一定要先关机器再开门,然后同样关闭门之后再开机。
3、使用均质机之前,一定要检查均质机内是否有异物,防止损伤机械装置或均质袋。
4、坚硬样品,尽量不要用拍打式均质机,防止均质袋破裂,冷冻样品需缓化解冻以后才能使用拍击式均质机。当一定要拍打坚硬样品时,一定要加套均质袋。
5、均质机的底部是空的,如遇均质袋意外破裂时,方便清理溢出物。
6、均质机和均质袋放置在阴凉干燥处,特别是均质袋应避酸碱、避阳光,防止其过早的变脆老化。
7、拍打式均质机用完之后,先关机断电,然后将其内外清理干净。
8、对于一些拍打均质后,容易堵塞移液管或移液器枪头的样品,建议使用带过滤网的无菌均质袋。