免疫磁珠技术之黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒介绍

黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒

       （产品编号：IMB103）   

使用对象：

黄曲霉毒素总量免疫磁珠试剂盒能够特异性的纯化与浓缩样品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。免疫磁珠试剂盒与磁珠自动工作站搭配使用，该方法速度快、操作简单、准确性高，对准确灵敏的测定样品中中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2起到十分重要的作用。

黄曲霉毒素磁珠试剂盒广泛地应用于粮食、食品、饲料、坚果、花生、酱油、醋、辣椒、胡椒、药材和酒类等样品的净化。

原理

样品经提取液提取、过滤后，放入键合有黄曲霉毒素特殊抗体的磁珠中。此时，黄曲霉毒素被免疫磁珠中的抗体特异性的吸附，用洗液将磁珠上的杂质除去，然后用洗脱液将黄曲霉毒素从磁珠上洗脱下来。最后，用HPLC或荧光计等仪器进行定量检测。

储存条件

该磁珠试剂盒保存在2-8 °C条件下，绝对不能冷冻，保质期为18个月。建议在室温（18-30°C）下使用。

实验溶液制备

1)       提取液，甲醇/水（7+3）：取70mL甲醇加30mL水，混合均匀。

2)       标准溶液的配制：取黄曲霉毒素混标（G1010，B1和G1为1.0ug/mL,B2和G2为0.3ug/mL），甲醇或50%甲醇水为稀释液，配制标准品溶液。例如：取100uL标准品原液于10mL容量瓶中，用10mL甲醇或50%甲醇水定容至10mL，那么，黄曲霉毒素B1和G1为10ng/mL，黄曲霉毒素B2和G2为3ng/mL.

    注：配制好的标准品溶液2-8℃冷藏保存有效期为24h。

液相色谱条件

    色谱柱：Cloversil-C18 4.6*150mm（5um）或4.6*250mm（5um）

流动相：甲醇-水（45+55，v/v）

流速：0.8mL/min

检测器：荧光检测器，激发波长360nm,发射波长440nm

进样体积：10uL（建议＜20 uL）

光化学衍生化系统：光化学衍生器有两接口（不分进出），分别与色谱柱出口或荧光检测器进口连接

分析步骤

1.0粮谷、植物油、花生等

1.1样品提取

1.1.1准确称取试样5.0g于50mL离心管中，准确加入20.0mL甲醇-水（7+3），以均质器高速搅拌提取3min或高速涡旋提取仪提取15min。

1.1.2用Clover-C式过滤杯过滤，备用；或微纤维滤纸过滤，备用。

1.2样品的净化

1.2.1将磁珠试剂盒上盖打开，放于专用架上。

1.2.2 准确吸取2.0 mL处理好的样品滤液注入试剂盒样品孔中（结合液孔），混匀。

1.2.3 将试剂盒放入到CLOVER免疫磁珠自动工作站内。选取AFTest-1 实验方法，仪器执行自动净化处理，净化程序大约20min完成。

1.2.4 处理完成后，将试剂盒取出，放于专用架上。

1.2.5 用移液器吸取洗脱液孔中洗脱液，用有机滤膜过滤到进样瓶中，注入HPLC或LC/MS检测。

或准确吸取500uL纯水加入到洗脱液孔中，混匀；用有机滤膜过滤到进样瓶中，注入HPLC或LC/MS检测。

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需要准备的设备及试剂