技术文章

1.简介

CM SepFast HighRes Plus是一组弱阳离子交换介质。结合容量和结合动力学高于IEX  SepFast  HighRes。由于CM SepFast HighRes Plus具有高分辨率和高载量，特别适用于需要以高通量和高成本效益的方式纯化困难分子的过程。

CM SepFast HighRes Plus采用平衡设计，可提供高分辨率和高载量，以分离生物工艺应用中的类似成分。核心优势是：

·高流速下的高样品载量

·高载量下的高分辨率

基础基质基质由高度交联的琼脂糖和葡聚糖制成，具有优异的流动性。它对生物加工行业中遇到的大多数化学条件都非常稳定。

2. 产品特性

表1  CM SepFast HighRes Plus的特性

*测试条件：10  mM缓冲液 pH  7.5，上样5 mg/ml 蛋白质，停留时间5分钟，50%穿透。

3.方法优化

建议在载量、流速、结合pH值、结合离子强度、洗脱速度和梯度等参数之间进行筛选。由于CM SepFast HighRes Plus的快速孔隙可及性，结合步骤可以在比洗脱步骤更快的流速下完成。建议特别注意优化洗脱条件以获得最佳分离能力。

强离子交换介质可以在较宽的pH范围内保持其电荷（并因此保持其功能），而弱离子交换介质的离解程度和离子交换容量随pH值而变化。因此，如果使用弱离子交换介质，优化pH值更为关键。

通常在优化方法时，平衡组分分离度与工艺产量是主要考虑因素。此外，对于不稳定或对剪切力敏感分子的纯化，需要优化操作条件以平衡产量和对目标分子可能造成的损害。

4.装柱

CM SepFast HighRes Plus由高度交联的珠状琼脂糖制成，具有出色的机械强度。CM SepFast HighRes Plus可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何类型的色谱柱中。典型的包装压力高达3 bar。

5.保养

根据不同的应用，介质可能会被多次使用。如需重复使用，请参阅以下说明。

（1）再生

每次运行后，用高离子强度溶液（例如1M NaCl缓冲液）或增加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是一种去除强结合物质的程序，例如再生后残留在吸附剂表面的脂质、内毒素和变性蛋白质。定期 CIP 可防止污染物在填充床中积聚，并有助于保持色谱柱性能。

应根据存在的污染物类型为每个过程制定具体的 CIP程序。CIP 的频率取决于各个应用的性质。

以下信息可作为一般指导：浓度高达2 M的盐可用于清除因离子相互作用而结合的杂质。疏水性结合的污染物可以通过以下试剂去除：1 M NaOH、低比例的非离子洗涤剂（例如0.1-2%）、碱性或酸性条件下的30%  异丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述试剂的组合。一般来说，孵育时间应该更长（例如从 30 min到2 h），以确保污染物WAN全解离。

（3）消毒

建议使用0.5‑1.0 M NaOH接触1 h进行消毒。

6.储存

CM SepFast HighRes Plus应储存在20%乙醇中（强阳离子交换介质含有0.2 M NaAC）以防止微生物生长。CM SepFast HighRes Plus存储在4℃到30℃的温度下。使用前，用至少5倍体积的运行缓冲液来平衡介质。

7.更多信息

了解更多关于BioToolomics产品代理信息请联系天津益元利康科技有限公司。 

8.订购信息