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简述大肠杆菌的正确使用方法

宁波泰斯拓生物技术有限责任公司

2023/5/5 9:25:15
   大肠杆菌(Escherichia coli),简称E.coli,是一种常见的革兰氏阴性菌,人和动物的肠道中都存在大量的大肠杆菌。在生命科学研究中,被广泛应用于基因表达、蛋白质表达和酶反应等方面。下面介绍一下它的使用方法。
 

 

  1.制备大肠杆菌培养基
 
  制备培养基是培养它不可少的步骤。选取适合其生长的培养基,在按比例混合后进行滤器灭菌。常用的培养基有Luria-Bertani(LB)培养基、M9培养基、超优培养基等。其中LB培养基最为常用,制备简单易行,成本较低。
 
  2.取样并接种
 
  在培养前,需要从凝胶管上提取培养物,并加入到含有培养基的瓶子中进行接种。接种时可以选择移液管或者注射器等工具,注意操作过程中要消毒清洗。
 
  3.培养条件
 
  其生长条件相对较为宽泛。通常在37度下培养,培养时间根据实验要求可长达数天。培养过程中要注意无菌操作、瓶盖勿开、颠倒培养等。
 
  4.分离纯化
 
  大肠杆菌是一种肠道菌群以下(通量) 的微生物,所以在培养过程中很容易出现杂菌。在进行特定实验时需要净化大肠杆菌。此时可以通过法拉第笼或者摸板法等方法进行筛选和分离。
 
  5.储存
 
  保藏温度通常是-80度冷冻库,若要长期保存,也可以使用甘油溶液预冷却后进行长期保存。
 
  总之,大肠杆菌的使用方法包括制备培养基、取样接种、培养条件、分离纯化和储存。希望本篇文章可以对大家在实际操作中有所帮助。

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