大肠杆菌(Escherichia coli),简称E.coli,是一种常见的革兰氏阴性菌,人和动物的肠道中都存在大量的大肠杆菌。在生命科学研究中,被广泛应用于基因表达、蛋白质表达和酶反应等方面。下面介绍一下它的使用方法。
1.制备大肠杆菌培养基
制备培养基是培养它不可少的步骤。选取适合其生长的培养基,在按比例混合后进行滤器灭菌。常用的培养基有Luria-Bertani(LB)培养基、M9培养基、超优培养基等。其中LB培养基最为常用,制备简单易行,成本较低。
2.取样并接种
在培养前,需要从凝胶管上提取培养物,并加入到含有培养基的瓶子中进行接种。接种时可以选择移液管或者注射器等工具,注意操作过程中要消毒清洗。
3.培养条件
其生长条件相对较为宽泛。通常在37度下培养,培养时间根据实验要求可长达数天。培养过程中要注意无菌操作、瓶盖勿开、颠倒培养等。
4.分离纯化
大肠杆菌是一种肠道菌群以下(通量) 的微生物,所以在培养过程中很容易出现杂菌。在进行特定实验时需要净化大肠杆菌。此时可以通过法拉第笼或者摸板法等方法进行筛选和分离。
5.储存
保藏温度通常是-80度冷冻库,若要长期保存,也可以使用甘油溶液预冷却后进行长期保存。
总之,大肠杆菌的使用方法包括制备培养基、取样接种、培养条件、分离纯化和储存。希望本篇文章可以对大家在实际操作中有所帮助。