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生物实验中刚果红是怎么用的?

浙江联硕生物科技有限公司

2023/5/15 15:45:50

刚果红染色法特指用刚果红将纤维素染色的方法。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,常用的刚果红染色法有两种。在刚果红中加入氯化钠可以可以使结合不牢的刚果红洗去。

刚果红的原理:

刚果红筛选主要是根据菌落降解纤维素,可以形成降解圈,氯化钠冲洗再烘干后可以让降解圈看的更清楚,更易观察、它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.在含有纤维素的培养基中加入刚果红染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明圈。


刚果红染色法的使用:

方法一,先培养微生物,再加入刚果红进行焰色反应

在长出菌落的培养基上,覆盖质量浓度为1 mg/mI的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物质的量浓度为l mol/l的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCl溶液,此时,产生纤维素酶的菌落周围将会出现透明圈。

(加NaCl的原因:刚果红是结合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细菌可以产纤维素酶,能分解这个多糖底物成为寡糖,这样刚果红就不能结合上去了,氯化钠就可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大小不一的透明圈,大的透明圈分解纤维素的能力就强)。


方法二,在倒平板时就加入刚果红

配制质量浓度为10 mg/mI的CR溶液,灭菌后,按照每200 mI培养基加入1 mICR溶液的比例,混匀后倒平板。等培养基上长出茵落后,产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。

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