Raw264.7细胞是一种常用的小鼠巨噬细胞系,具有许多研究应用。该细胞系来源于小鼠ABJ大肠腺瘤,是一种易于培养和大量扩增的免疫细胞系。特点是其具有贪婪力和吞噬作用。这种细胞可以吞噬细菌、真菌、病毒、细胞碎片等多种物质,且具有抗菌、抗病毒能力。另外,还参与了体内的免疫调节功能,它可以分泌细胞因子,如TNF-α、IL-1β、IL-6等,对免疫细胞的发育、分化和免疫反应等起重要作用。
Raw264.7细胞对一些疾病的发生和发展具有重要作用。例如,炎症和肿瘤都密切相关。这些细胞能够释放促炎症因子和细胞因子,进而引起炎症反应。此外,可以通过其巨噬细胞的功能抑制肿瘤细胞生长。使用无菌实验技术进行细胞培养,可以获得高质量的Raw264.7细胞。鉴于该细胞系具有多种功能,使用还需要特别注意一些重要的事项,例如细胞传代数、细胞滋养和培养条件的控制,细胞的维持、质量检测等。
RAW264.7细胞广泛应用于炎症、免疫、肿瘤等领域的研究:
1.免疫应答:可以诱导炎症反应和产生各种细胞因子,如TNF-α、IL-1β、IL-6等,对外界病原微生物及其产生的致病物质进行清除和抵御。
2.紫杉醇治疗:紫杉醇是一种抗癌药物,用于治疗多种癌症,可以通过体外实验来研究紫杉醇的治疗机制及其影响因素。
3.肿瘤细胞毒性:对某些肿瘤细胞具有细胞毒性,可以用于体外筛选和研究抗肿瘤药物。
4.细胞凋亡:可以接受不同的刺激,诱导发生自我凋亡,可以用于模拟某些疾病病理过程的体外实验。
RAW264.7细胞的培养方法:
1.培养基:DMEM高糖培养基。
2.细胞传代:当细胞密度达到80-90%时,用0.05%胰酶(Trypsin)将细胞从培养瓶中脱落,收集细胞,用培养基洗涤1-2次,细胞计数后平均分配到新的培养器皿中。
3.细胞的维持和分离:将细胞在37℃和5%CO2的条件下维持生长,在培养时要及时更换培养基。如果需要细胞的分离,可以使用0.05%胰酶将细胞离心后,再次悬液。
4.细胞的处理:将细胞移至96或24孔培养板并孵育。进行药物处理和细胞收集。
5.细胞的冻存:当细胞达到90%的一天,吸附培养基后,加入5%gl单糖,并快速冷却至-80℃保存。
6.细胞的代谢测定:可以通过MTT等荧光剂或基因表达检测等方法进行细胞代谢测定。