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疏水层析填料的发展背景概括

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2023/5/19 11:42:32
  一、背景原理分析:
 
  1.生物分子表面大都含或强或弱的疏水区域,在不同环境下,与各种疏水介质产生不同强弱和结合。
 
  2.高离子强度可加强疏水性。和离子交换刚刚相反,高盐吸附,低盐洗脱。经洗脱样品又可直接或稍加稀释后上。
 
  3.其它层析柱,做为连接下游和层析步骤的桥梁。并可*取代传统的盐析沉淀技术,更符合工业生产要求。
 
  4.比反相层析介质的配体密度低许多,无需有机溶液剂洗脱,保存生物活性。配体种类繁多,提供宽广的选择性。
 
  二、疏水层析也称疏水作用层析(hydrophobicinteractionchromatographyHIC)。蛋白质表面一般有疏水与亲水基团,疏水层析是利用蛋白质表面某一部分具有疏水性,与带有疏水性的载体在高盐浓度时结合。在洗脱时,将盐浓度逐渐降低,因其疏水性不同而逐个地先后被洗脱而纯化,可用于分离其它方法不易纯化的蛋白质。
 
  三、HIC配基基团一般为丁基、苯基、辛基,其碳链分别为C4,C6(苯环)和C8。一般来说,碳链越长,表面疏水性越高。影响疏水作用的因素包括:盐浓度,温度,pH,表面活化剂和有机溶剂。疏水层析的应用与离子交换层析的应用刚好互补,因此,可以用于分离离子交换层析很难或不能分离的物质。
 
  四、优势特点:
 
  可提供从分析到全生产规模的所有包装尺寸;
 
  化学稳定的琼脂糖基质;
 
  可在高和低配体密度、交替交联水平和不同珠粒尺寸下生产,以优化分离介质;
 
  所有版本都可以按比例放大并生产,以供GMP使用。

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