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2023/6/12 16:35:14内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来,所以叫做内毒素。又称之为“热原”,单位Eu/ml。
内毒素在哪里?
主要存在于革兰氏阴性菌,衣原体,螺旋体,支原体,立克次体中。
有啥特点?
● 对理化因素稳定,160℃ 2-4小时被破坏
● 毒性较弱,对组织无选择性
● 不能用甲醛脱毒制成类毒素
毒性反应如何?
● 致发热反应
人体对细菌内毒素极为敏感。极微量(1-5ng/kg体重)内毒素就能引起体温上升,发热反应持续约4小时后逐渐消退。
● 白细胞反应
绝大多数被革兰氏阴性菌感染的患者血流中白细胞总数都会增加。
● 内毒素血症和内毒素休克
当病灶或血流中革兰氏阴性病原菌大量死亡,释放出来的大量内毒素进入血液时,可发生内毒素血症。并产生大量生物活性物质,作用于小血管造成功能紊乱而导致微循环障碍、低血压、缺氧、酸中毒等,于是导致病人休克,这种病理反应叫做内毒素休克。
看了以上的介绍,是不是觉得内毒素真的好可怕呀。感觉“毒”得过欧阳锋了。
内毒素的控制是各大药厂和医疗器械行业必须面对的挑战,因此灵敏可靠的内毒素定量检测技术是非常重要的。
检测方法
经过几十年的发展和改良,鲎试剂内毒素检测法已广泛应用于注射用药品、医疗器械、药用包材和辅料、水质、培养基、化妆品、食品检测以及临床和诊断等各大领域。如今,还有基于荧光的重组C因子法,已被美国和欧洲药品监管机构接受。
当
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赛默飞家的黄药师要出场啦~
那就是配套的内毒素检测仪器和试剂,以及内毒素去除树脂。
内毒素去除可以在检测前,也可以在检测后。
Thermo Fisher Scientific高载量内毒素去除树脂(货号88270)
➤ 结合力可以达到2,000,000 EU/mL
➤ 在处理初始内毒素水平为10,000 EU/mL的样品时,去除效率可以达到99%以上
我们再来看看如何检测内毒素。
检测步骤(举例)
A. 终点显色基质法(终点比色法)
Pierce™ 显色内毒素定量试剂盒具有:
● 出色的灵敏度0.01-0.1 EU/mL和0.1-1.0 EU/mL
● 一致性和可重复性高
● 还有抗干扰性强
(勘误:上图第六步为在405nm读数)参考微信文章“适用于多种样品的高灵敏内毒素检测方法”
B. 重组C因子法
荧光法的操作步骤大致相同,如下所示:
无论是光度法检测,还是重组C因子法检测,赛默飞都可提供配套仪器方案
● 从读取数据➝分析数据➝检测报告,一站式获得可靠结果
● 所有仪器均采用SkanIt软件,简单易用,药研版符合 FDA 21 CFR 第 11 部分要求
● 提供3Q认证,为您的实验保驾护航
内毒素检测仪器列表