如何用PBS缓冲液清洗细胞？

一：取材

撕取洋葱鳞茎内表皮2～3mm2置于载玻片上，用吸管加6mmoI的PBS缓冲液两滴，使材料充分浸入到液体中，处理约5分钟。

二：去垢处理

用吸水纸吸净浸泡材料的PBS缓冲液，加2～3滴37°C预温的去垢剂1%TritonX-100，使液体充分浸泡材料，并立即放入37C水浴锅中处理15分钟。

三：冲洗

吸去 1%Triton，用6mmol的PBS缓冲液轻轻冲洗，反复两至三次。

四：固定

用吸水纸吸尽PBS缓冲液，加2滴3%戊/二/q固定约20分钟。

五：冲洗

吸去3%戊二/醛固定液，用6mmol的PBS缓冲液轻轻冲洗，反复两至三次。

六：染色

吸去PBS缓冲液，滴几滴0.2%考马斯亮蓝R250染料，染色约10分钟。

七：制片

加盖盖玻片，用吸水纸吸去多余染料。

八：观察

观察将制好的玻片置于低倍镜下，可见到规则排列的多边形洋葱表皮细胞轮廓，在细胞质中可见到被染成蓝色的粗细不等的分枝状或点状结构，这就是细胞骨架。然后转高倍镜继续观察，调节细准焦螺旋可见到细胞骨架的立体结构。