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大鼠TNF-α ELISA试剂盒实验原理及操作事项

上海沪宇ELISA试剂盒厂家

2011/10/11 10:07:11

大鼠TNF-α  ELISA试剂盒使用目的:
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中TNF-α含量。
 

实验原理
大鼠TNF-α  ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠TNF-α水平。用纯化的大鼠TNF-α抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入TNF-α,再与HRP标记的TNF-α抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的TNF-α呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠TNF-α浓度。

大鼠TNF-α  ELISA试剂盒注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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